Agar je žele poput tvari koja se dobiva iz pročišćenih staničnih stijenki crvenih algi. Dodaje se mikrobiološkim medijima, koji su materijali na kojima se mikroorganizmi uzgajaju u laboratorijima, kako bi tvar dobila više čvrste strukture. Agar nema hranjivu vrijednost, pa kad ga znanstvenici koriste za uzgoj mikroorganizama, dodaju razne hranjive sastojke kako bi povećali rast bakterija u Petrijevim zdjelicama ili epruvetama. Kada istraživači pohranjuju bakterije u epruveti, to se naziva nagibom agara, jer se tekući medij za rast stvrdnjava dok je epruveta u nagnutom položaju. Gornji poklopac na nagibu sprječava isušivanje agara.
Medij se za ukose priprema drugačije od petrijevih zdjelica. Sterilizacija se vrši pomoću agara u cijevima; petrijeve zdjelice se prethodno steriliziraju prije nego što se u njih ulije sterilizirani agar. Izmjerite potrebnu količinu vode i stavite je u Erlenmeyerovu tikvicu. Zagrijte ga na štednjaku dok gotovo ne zakipi. Po potrebi dodajte ostale sastojke i polako i neprestano miješajte smjesu dok se ne otope. Ti sastojci mogu uključivati ekstrakt govedine, pepton i pH pufere, ovisno o vrsti mikroorganizma koji se uzgaja.
Prije dodavanja dehidriranog praška agara pomiješajte ga s malom količinom hladne destilirane vode kako biste spriječili stvaranje nakupina. Budite oprezni kada dodajete agar vrućoj tekućini jer se može zapjeniti i preliti posudu. Dodajte male količine agara odjednom i promiješajte da se agar ravnomjerno rasporedi. Isključite vatru kad se smjesa počne kuhati na pari, prije nego što zavrije.
Stavite bez poklopca epruvete na nosač epruveta. Ispunite epruvete prenoseći oko 5 mililitara - oko 0,17 unci ili 1 čajnu žličicu - rastopljenog agara iz posude pomoću sterilne pipete. Labavo zatvorite svaku epruvetu, jer se agar neće sterilizirati ako su dobro zatvorene. Sterilizirajte sve epruvete u autoklavu oko 25 minuta na 121 Celzijev stupanj ili 250 stupnjeva Fahrenheita.
Kad je agar još vruć, pažljivo nagnite stalak držeći epruvete na čvrstoj površini ili a debela knjiga, pazeći da medij unutar cijevi bude u kosom položaju u odnosu na test cijevi. Ostavite da se medij ohladi i skrutne pod tim kutom, što povećava površinu agara. Pritegnite poklopce epruveta nakon što se agar ohladi. Nagibi su spremni za upotrebu nakon što se agar očvrsne. Mogu se čuvati na sobnoj temperaturi ili u hladnjaku za buduću upotrebu.
Inokulirajte nagib prenošenjem stanica s inokulacijskom petljom iz mikroorganizma s jednom kolonijom na ploči na površinu ukosa. Pomaknite petlju po površini kosog sloja i prislonite cijevi. Inkubirajte nagnuti sloj dok ne postoje dokazi o rastu, a zatim stavite epruvetu u hladnjak.