Znanstvenici i istraživači proučavaju rast bakterija pripremajući kulture u laboratoriju. Petrijeve posude koje sadrže hranjivi agar uzgajaju bakterijske kulture jednim potezom ili inokulacijom. Studenti mogu pripremiti hranjivi agar kod kuće koristeći zalihe iz prehrambenih proizvoda ili trgovina zdrave hrane za projekt znanstvenog sajma. Uobičajeni kuhinjski uređaji i osnovno posuđe pružaju alate za pripremu sterilnog medija za kulturu koji se može dozirati u petrijevke. Slijeđenje sterilnih tehnika zagrijavanjem materijala i održavanjem površina čistim i suhim poboljšat će rezultate sprečavanjem plijesni i čestica da zagađuju kulturu.
Stavite filter za kavu u cjedilo i objesite cjedilo preko otvora prozirne posude.
Polako ulijte juhu u filtar, pazeći da juha ne prelije sa strana filtra. Ako se filtar začepi česticama, uklonite upotrijebljeni filtar, zamijenite ga čistim filterom i nastavite točiti juhu.
Uklonite cjedilo i filtar s vrha posude i promatrajte čini li se juha bistrom (tj. U tekućini nema suspendiranih čestica). Ako čestice plutaju u tekućini, ponovite korake 1 i 2 koristeći drugu prozirnu posudu i filtar za svježu kavu.
Stavite lonac na štednjak i ulijte bistru juhu u lonac.
Dodajte 16 unci destilirane vode u lonac u kojem se nalazi juha.
Uključite štednjak i podesite vatru na srednje nisku. Zagrijte juhu na laganoj vatri (tj. Pojavljuju se mali mjehurići uz bok lonca).
Dodajte 1 čajnu žličicu praha agar-agar u juhu koja vari (približno 2,5 grama) i miješajte smjesu dok se prašak ne otopi. Obavezno promiješajte prašak da se otopi i spriječite da želatina potone na dno posude (gdje može izgorjeti).
Ponavljajte korak 7 dok se sav prah agar-agar ne otopi u juhi.
Nastavite miješati juhu otprilike 1 minutu kako biste osigurali da se sav prah potpuno otopi.
Isključite štednjak, stavite poklopac na lonac i pustite da se tekućina hladi najmanje 15 minuta.
Složite sterilne petrijevke u red za jednostavnu montažu, ali nemojte uklanjati poklopce. Ako želite, stavite trivet da drži toplu posudu. Ako umjesto petrijevih zrnaca upotrebljavate šalice kreme s poklopcem, sterilizirajte šalice kreme tako da stavite šalice i poklopce preokrenite (naopako) na foliju prekrivenu pločom kolačića i pecite u pećnici najmanje jedan sat na 375 stupnjeva Fahrenheit. Prije upotrebe provjerite jesu li sterilizirane šalice i poklopci potpuno ohlađeni.
Pažljivo dodirnite vanjsku stranu lonca kako biste provjerili je li topao na dodir i stavite lonac na trivet. Ako je lonac prevruć na dodir, pričekajte najmanje 10 minuta da se lonac ohladi.
Skinite poklopac i ostavite sa strane. Stavite kutlaču u lonac.
Skinite poklopac s jedne petrijevke i dozirajte hranjivu juhu da napunite posudu do pola. Pokrijte posudu odmah svojim poklopcem.
Ponovite korak 14 za svaku od petrijevih zdjelica.
Ostavite da se hranjiva juha stvrdne u petrijevkama najmanje 1 sat, neometano.
Lagano protresite petrijevke jednu do druge kako biste provjerili je li se hranjiva juha potpuno skrutnula. Ako juha nije potpuno gelirana, pričekajte još 20 minuta prije ponovne provjere.
Pokrijte stol ili ravnu površinu kolutom papirnatih ručnika kako biste stvorili sterilno radno područje. Otrgnite list papirnatog ručnika i savijte ga četiri puta da biste stvorili gusti, pravokutni snop. Postavite ovaj snop na jedan kraj radnog područja.
Prenesite jednu petrijevku na sterilno radno područje i skinite poklopac. Pažljivo preokrenite posudu i postavite jedan kraj na stranu presavijene vate, tako da leži obrnuto i blago pod kutom (s malim razmakom od papira papirnatih ručnika).
Okrenite poklopac i stavite ga iznad petrijevke na sterilnu radnu površinu. Ako se kapice vode pojave na poklopcu, lagano otresite tu vlagu prije stavljanja na pokrivenu površinu, ali nemojte dodirivati unutrašnjost poklopca.
Ponovite korake 19 i 20 za svaku petrijevku, smještajući jednu stranu obrnute posude na stranu prethodne posude, a ne na vatu papirnatog ručnika. Posuđe će se pojaviti u raspoređenom rasporedu, s prazninama na jednoj strani tako da višak vlage može ispariti.
Pogledajte obrnute petrijevke kako biste provjerili je li vlaga na stranama ploča isparila. Nakon što se sva vlaga raščisti, okrenite ploče desnom stranom prema gore i odmah pokrijte poklopcima za upotrebu.
Hranjivi agar inokulirajte na tanjur brisanjem brisa koji sadrži željenu kulturu na površinu hranjivog agara prije pokrivanja poklopcem. Okrenite petrijevku tako da čvrsta supstanca bude na vrhu. Inokuliranu petrijevku spremite s krutom materijom na vrh za uzgoj i poklopcem na dnu kako biste uhvatili vlagu, rastresite čestice ili rast.
Stvari koje ćete trebati
- Filteri za kavu
- Cjedilo
- 2 velike, bistre zdjele
- 16 oz. goveđa juha bez masti
- 16 oz. destilirana voda
- Lonac za kuhanje s poklopcem
- Štednjak
- 10 grama agar agar
- Mjerna žlica
- Mješalica
- Rola papirnatih ručnika
- Držači za posude
- Metalna kutlača
- Sterilne petrijeve posude ili prozirne čašice od kreme s poklopcem
- Po izboru: timer, trostruka pećnica, pećnica, tava, aluminijska folija, tava
Savjeti
Ako se na poklopcima pojavi prekomjerna vlaga, osušite i sterilizirajte poklopce u pećnici postavljenoj na 375 stupnjeva Fahrenheita za najmanje 1 sat (položite poklopce u čistu posudu obloženu aluminijskom folijom prije nego što ih postavite u pećnica).
Upozorenja
-
Budite pažljivi prilikom rukovanja vrućim loncem kako biste izbjegli opekline. Ako je strana posude prevruća, tekućina u posudi je jako vruća. Hranjiva juha treba biti topla za doziranje u posuđe, ali ne prevruća da stvara pretjeranu kondenzaciju u petrijevim zdjelicama tijekom hlađenja i stvrdnjavanja.
Ne dodirujte unutrašnjost petrijeve zdjelice (tj. Tanjura ili poklopca) kako biste izbjegli unošenje neželjenih bakterija u kulturu.