Western blot test, također nazvan imunoblotting, test je za određeni protein unutar proteinske smjese. Western blot test provodi se nakon gel-elektroforeze ili testa enzimski povezane imunosorbentske analize (ELISA), a koristi antitijela za identifikaciju specifičnih proteina.
Elektroforeza u natrijevom dodecil sulfatu u poliakrilamidnom gelu (SDS-PAGE) uobičajeni je test koji se koristi za odvajanje proteina za upotrebu u Western blot-u. Proteini su odvojeni težinom i električnim svojstvima dok se kreću kroz matricu gela.
ELISA test koristi enzime ili antitijela pričvršćena na čvrstu površinu za stvaranje testne površine. Zatim se uzorak doda na ispitnu površinu. Protutijela ili enzimi koji reagiraju ili se vežu na proteine ukazuju na pozitivan rezultat.
Western blot test provodi se nakon gel-elektroforeze. Odvojeni proteini se prenose (ili upijaju) na nitrocelulozne ili najlonske membrane i identificiraju pomoću specifičnih antitijela koja su označena sekundarnim proteinom.
Western blot test koristi se za potvrđivanje pozitivnih rezultata bilo gel-elektroforezom ili ELISA testovima. Western blot test može preciznije identificirati proteine i može isključiti lažno pozitivne rezultate.