सूक्ष्म जीव विज्ञान सूक्ष्म जीवों का अध्ययन करता है और विभिन्न प्रकारों को नेत्रहीन रूप से अलग करने के तरीकों की आवश्यकता होती है। माइक्रोबायोलॉजिस्ट धुंधला प्रक्रियाओं का उपयोग करते हैं जो विभिन्न प्रकार के जीवों में रंग जोड़ते हैं। ये दाग ऐसे रसायन होते हैं जो अलग-अलग रंगों के होते हैं, लेकिन ये रसायन स्वयं जीवों से चिपकते नहीं हैं। इस प्रकार, एक सूक्ष्म जीवविज्ञानी दाग में एक चुभन जोड़ता है। एक मॉर्डेंट को शास्त्रीय रूप से एक आयन के रूप में परिभाषित किया जाता है जो एक रासायनिक डाई को बांधता है और इसे नीचे रखता है, जैसे कि डाई जीव पर चिपकी रहती है। हालांकि, कोई भी रसायन जो डाई को अपनी जगह पर रखता है, उसे भी मोर्डेंट माना जा सकता है।
टीएल; डीआर (बहुत लंबा; पढ़ा नहीं)
एक मॉर्डेंट जीव को डाई "फिक्स" करता है, ताकि वे डाई को जगह पर रख सकें।
पुल
सूक्ष्म जीव विज्ञान में, एक मोर्डेंट एक यौगिक है जिसका उपयोग एक दाग के अणुओं को एक सूक्ष्मजीव पर रखने के लिए किया जाता है। शास्त्रीय रूप से परिभाषित, मॉर्डेंट आमतौर पर आयन होते हैं जैसे धातु आयन या हलाइड आयन, लेकिन कोई भी अणु हो सकता है जो डाई को दबाए रखने के उद्देश्य से कार्य करता है। हालांकि, फिनोल नामक एक अणु एक गैर-आयनिक मोर्डेंट है जिसकी चर्चा नीचे की गई है। कुछ मोर्डेंट सूक्ष्मजीव पर डाई और प्रोटीन दोनों को बांधते हैं। अधिकांश मोर्डेंट आयन होते हैं क्योंकि आयन पर विद्युत आवेश एक रासायनिक डाई पर विद्युत आवेश को आकर्षित करता है। इस प्रकार, जब आयन डाई को बांधता है, तो वे एक बड़ा परिसर बनाते हैं जो अवक्षेपित होता है - जिसका अर्थ है कि वे एक ठोस हो जाते हैं और अब घोल में नहीं घुलते हैं। मॉर्डेंट डाई को दबाते हैं, या वजन कम करते हैं, ताकि यह धुंधला होने की शेष प्रक्रिया के दौरान धुल न जाए। धुलाई इसलिए की जाती है ताकि केवल वास्तविक धुंधला क्षेत्रों की कल्पना की जा सके।
ग्राम स्टेनिंग
माइक्रोबायोलॉजी में एक बहुत ही सामान्य प्रकार का धुंधलापन ग्राम धुंधला हो जाना है। बैक्टीरिया में कोशिका भित्ति होती है जो उनके प्लाज्मा झिल्ली को घेर लेती है और उन्हें शारीरिक सुरक्षा प्रदान करती है। ग्राम दाग ग्राम-पॉजिटिव और ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया के बीच अंतर करता है। ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया में ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया की तुलना में मोटी कोशिका भित्ति होती है। ग्राम धुंधलापन तब किया जाता है जब रासायनिक डाई क्रिस्टल वायलेट को मॉर्डेंट आयोडीन के साथ मिलाया जाता है। आयोडीन और क्रिस्टल वायलेट एक बड़े परिसर का निर्माण करते हैं जो घोल से बाहर निकलते हैं। धुंधला होने की प्रक्रिया के दौरान, बैक्टीरिया को अल्कोहल से नहलाया जाता है, जिससे कोशिका की दीवारें सिकुड़ जाती हैं। यह संकोचन कोशिका भित्ति में आयोडीन-क्रिस्टल वायलेट कॉम्प्लेक्स को फंसा देता है, जो ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया को बैंगनी रंग देता है। .
आयरन हेमेटोक्सिलिन धुंधला हो जाना
माइक्रोबायोलॉजी में एक और आम दाग लोहे के हेमटॉक्सिलिन का दाग है। हेमटॉक्सिलिन सूक्ष्मजीवों के नाभिक में डीएनए को दाग देता है। आयरन हेमटॉक्सिलिन मनुष्यों के मल में परजीवियों की कल्पना करता है। आयरन वह मार्डेंट है जो धुंधला होने की प्रक्रिया के दौरान हेमटॉक्सलिन को धोने से रोकता है। लौह आयनों को फेरस अमोनियम सल्फेट और फेरिक अमोनियम सल्फेट के रूप में हेमटॉक्सिलिन में जोड़ा जाता है। फेरस का मतलब है कि लोहे के परमाणु में +2 का चार्ज होता है, और फेरिक का मतलब है कि आयरन आयन +3 के चार्ज के रूप में।
एसिड-फास्ट दाग
एसिड-फास्ट स्टेनिंग का उपयोग थूक में माइकोबैक्टीरिया की उपस्थिति का पता लगाने के लिए किया जाता है, जो लार और बलगम का मिश्रण होता है जिसे खांसी होती है। रासायनिक डाई फ्यूचिन इन जीवाणुओं को दाग देता है, लेकिन फिनोल - कार्बोलिक एसिड के रूप में - वह रसायन है जो माइकोबैक्टीरिया की कोशिका भित्ति में फ्यूचिन रखता है। फ्यूचिन फिनोल में अच्छी तरह से घुल जाता है, लेकिन पानी या अल्कोहल में नहीं। बदले में, फिनोल माइकोबैक्टीरिया की मोमी कोशिका भित्ति के साथ अच्छी तरह से मिल जाता है। इस प्रकार, फिनोल एक टैक्सी कैब के रूप में कार्य करता है जो फ्यूचिन को सेल की दीवार में बंद कर देता है। फिनोल एक धात्विक या हैलाइड आयन नहीं है, बल्कि एक मोर्डेंट के रूप में कार्य करता है क्योंकि यह डाई को जगह पर रखता है।