जेल वैद्युतकणसंचलन में त्रुटि के स्रोत

जेल वैद्युतकणसंचलन डीएनए के विश्लेषण के लिए आणविक जीव विज्ञान में उपयोग की जाने वाली प्रमुख विधियों में से एक है। इस पद्धति में एक जेल के माध्यम से डीएनए के टुकड़ों का प्रवास शामिल है, जहां उन्हें आकार या आकार के आधार पर अलग किया जाता है। हालांकि, जेल वैद्युतकणसंचलन जैसी वैज्ञानिक रूप से ध्वनि विधि भी त्रुटियों से प्रतिरक्षित नहीं है।

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जेल वैद्युतकणसंचलन में आमतौर पर agarose जैसे पॉलिमर से बने जेल का उपयोग शामिल होता है। जेल को एक बफर समाधान में डुबोया जाता है जो विद्युत क्षेत्र का संचालन करता है। ब्याज के डीएनए नमूने को पहले प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग करके खंडित किया जाता है और फिर जेल में इंजेक्ट किया जाता है। जब विद्युत क्षेत्र चालू होता है, तो जेल में डीएनए के टुकड़े सकारात्मक इलेक्ट्रोड की ओर चले जाते हैं। यदि डीएनए के टुकड़े अलग-अलग आकार के हैं, तो प्रत्येक आकार के टुकड़े के लिए प्रवास का समय अलग होगा। टुकड़ों को फिर एक डाई या ऑटोरैडियोग्राफी का उपयोग करके देखा जाता है और जेल में बैंड के रूप में दिखाई देता है।

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वैद्युतकणसंचलन का प्रमुख अनुप्रयोग आणविक जीव विज्ञान में डीएनए के विश्लेषण के लिए एक उपकरण के रूप में है, लेकिन इसका उपयोग फोरेंसिक में अपराध स्थल से नमूनों की पहचान करने के साधन के रूप में भी किया जाता है। यह महत्वपूर्ण है कि सटीक परिणाम प्राप्त करने के लिए इस तकनीक में त्रुटियों के स्रोतों को कम से कम किया जाए। त्रुटि का एक स्रोत डीएनए नमूने का संदूषण है। यदि नमूने में विदेशी डीएनए है, तो जेल में केवल शुद्ध किए गए नमूने वाले जेल की तुलना में अधिक बैंड होंगे।

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त्रुटियों से बचने के लिए जेल की सांद्रता भी सही होनी चाहिए। यदि सांद्रता बहुत अधिक या बहुत कम है, तो टुकड़े या तो बहुत धीरे-धीरे या बहुत तेज़ी से पलायन करेंगे। इससे विभिन्न बैंडों को हल करने में त्रुटियां होंगी। वैद्युतकणसंचलन चलाने के दौरान, यह सुनिश्चित करने के लिए ध्यान रखा जाना चाहिए कि वोल्टेज स्थिर है। वोल्टेज में किसी भी उतार-चढ़ाव के परिणामस्वरूप डीएनए अंशों का अस्थिर प्रवास होगा, जिससे बैंड पढ़ने में त्रुटियां हो सकती हैं। बफर समाधान भी सही संरचना का होना चाहिए, क्योंकि गलत पीएच या आयनिक सांद्रता वाला बफर डीएनए के टुकड़ों के आकार को बदल देगा, साथ ही उनके प्रवास के समय को भी बदल देगा।

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सबसे महत्वपूर्ण बात, जेल को ठीक से देखा जाना चाहिए। यदि नमूनों की कल्पना करने के लिए प्रयुक्त डाई या रेडियोधर्मी जांच की सांद्रता बहुत अधिक है, तो परिणामी छवि बहुत गन्दा होगी, क्योंकि अवशिष्ट अंशों की भी कल्पना की जाएगी। यदि जेल एकाग्रता बहुत कम है, तो कोई दृश्य नहीं होगा। जब सभी चरणों के दौरान सही प्रक्रियाओं का पालन किया गया है, तो जेल वैद्युतकणसंचलन ऐसे परिणाम देगा जो सटीक हैं और बड़े आत्मविश्वास के साथ उपयोग किए जा सकते हैं। सभी वैज्ञानिक प्रक्रियाओं की तरह, जेल वैद्युतकणसंचलन त्रुटियों के लिए प्रवण हो सकता है, लेकिन इन्हें उचित तैयारी और प्रबंधन के साथ कम किया जा सकता है।