Un royaume autrefois invisible a été révélé au début des années 1600 avec la construction des premiers microscopes composés qui a conduit à des révisions majeures de la compréhension scientifique. Les microscopes composés de base sont désormais un équipement standard en médecine et en sciences naturelles. La lumière visible transmise brille à travers de fines préparations pour le grossissement. Microscopes électroniques à transmission et à balayage développés à partir de 1931. Ils n'utilisent pas de lumière optique, mais des faisceaux d'électrons et des champs magnétiques pour visualiser les spécimens. Principalement pour la recherche institutionnelle, la préparation des échantillons nécessite un équipement complexe et coûteux.
Comprendre les microscopes composés
Il existe plusieurs types spécialisés de microscopes composés, mais les microscopes à champ clair sont les plus courants. Les échantillons pour eux ne devraient avoir que quelques microns, soit un millionième de mètre d'épaisseur. Les spécimens plus épais ne laissent pas passer assez de lumière et ne permettent pas une mise au point précise. Les microscopes à fond clair ont un tube avec des lentilles d'objectif en bas, le plus proche de l'échantillon, et une lentille oculaire, ou oculaire, en haut. Plusieurs lentilles d'objectif de différents grossissements tournent sur une tourelle. La platine juste en dessous de l'embout porte la lame d'échantillon, et en dessous une source de lumière brille à travers un condenseur jusqu'à l'échantillon. Les microscopes composés modernes peuvent grossir un objet de 1 000 à 2 000 fois ses dimensions d'origine.
Montures entières
Pour les petits objets tels que les poils, les petits insectes, les parties d'insectes ou les grains de pollen, l'échantillon est placé directement sur la partie centrale d'un lame de microscope en verre ou en plastique avec une petite quantité de milieu de montage, généralement un produit en résine synthétique ou naturelle pour diapositives. Pour les lames temporaires, telles qu'une goutte d'eau de bassin contenant des micro-organismes, l'eau est le support de montage. Protégez les échantillons avec une lamelle, un morceau de verre ou de plastique rond ou carré très fin. Certains échantillons nécessitent une coloration avec des colorants naturels ou synthétiques destinés à être bien vus en microscopie.
Courges et frottis
Une façon simple de préparer un échantillon mince est d'écraser ou d'aplatir un petit morceau de tissu sous la lamelle. Souvent utilisé dans les échantillons de plantes pour voir les chromosomes, les tissus à croissance rapide tels que les pointes des racines ou les anthères subissant la division cellulaire sont conservés dans un fixateur, puis ramollis et colorés pour révéler le chromosomiques. Une légère pression de l'extrémité gomme d'un crayon centrée sur l'échantillon recouvert d'un couvre-objet force les cellules à se séparer en une seule couche. Dans les frottis, l'échantillon est étalé finement sur une lame en utilisant une autre lame comme étaleur, et le frottis résultant est séché et coloré. En médecine, des échantillons de fluides corporels, tels que le sang, le liquide céphalo-rachidien ou le sperme sont étalés.
Coupes de tissus colorées
Une procédure de sectionnement plus compliquée se produit lorsque la structure et l'organisation d'un petit organisme entier ou d'un morceau de tissu doivent être étudiées. Pour la plupart des échantillons, le tissu est d'abord préservé et durci et l'eau éliminée. Ensuite, l'échantillon est incorporé dans un support rigide tel que de la cire ou du plastique et tranché en sections très fines de quelques microns d'épaisseur seulement à l'aide d'une machine de précision appelée microtome. L'échantillon est orienté pour donner des coupes transversales ou des coupes longitudinales lorsqu'il est tranché. Les coupes sont collées sur des lames de microscope, le milieu d'enrobage est retiré et les tissus sont colorés pour différencier les structures et les cellules. Lorsque la vitesse est essentielle, comme dans les biopsies chirurgicales pour le cancer, les échantillons sont congelés, tranchés avec un microtome de congélation, colorés et examinés.