Bien qu'elles ne soient pas visibles à l'œil nu, les bactéries sont partout. Ils existent dans les aliments, le sol, l'eau, les surfaces de nos maisons et dans et sur notre corps. Les bactéries existent généralement dans des populations mixtes. L'isolement d'une bactérie spécifique d'autres espèces bactériennes dans un échantillon donné permet aux microbiologistes d'étudier sa structure et sa fonction, caractéristiques utilisées dans son identification. Les microbiologistes isolent fréquemment les bactéries en utilisant l'une des nombreuses techniques de plaques à stries.
Outils
Une anse d'inoculation est utilisée pour transférer les micro-organismes. Il se compose d'un fil de nichrome ou de platine avec une petite boucle circulaire à une extrémité. L'autre extrémité est droite et se glisse dans une poignée. Des boucles d'inoculation jetables en plastique sont également disponibles. Les bactéries ne peuvent être isolées que si elles se développent. Les microbiologistes cultivent des bactéries pour l'isolement des plaques de stries dans des boîtes de Pétri rondes et peu profondes remplies d'un milieu solide, appelé gélose. La gélose imite l'environnement dans lequel les bactéries se développent naturellement. Les boîtes remplies de milieux sont stériles et munies d'un couvercle pour empêcher la croissance d'organismes indésirables. Pendant l'isolement de la plaque à stries, la boucle d'inoculation est stérilisée à plusieurs reprises dans la flamme d'un bec Bunsen.
Principe
La technique de la plaque à stries est la méthode la plus populaire pour isoler des bactéries spécifiques à partir d'un échantillon contenant un mélange de micro-organismes. La technique dilue essentiellement le nombre d'organismes et réduit leur densité. Il permet aux microbiologistes de distinguer et d'isoler des colonies bactériennes individuelles. Une colonie est un amas visible de bactéries. Toutes les bactéries d'une même colonie proviennent de la même cellule bactérienne. Par conséquent, les colonies individuelles sont des colonies « pures ». La colonie pure est transférée dans une autre plaque pour produire une culture pure constituée d'un type de bactéries.
Procédure
Lorsqu'il est effectué correctement, l'isolement sur plaque de stries éclaircit un échantillon et permet aux cellules bactériennes individuelles de se développer en colonies isolées. Un microbiologiste commence par stériliser l'anse d'inoculation à la flamme. Elle refroidit la boucle en la touchant à la gélose, puis plonge la boucle dans l'échantillon et l'étale d'avant en arrière pour couvrir une section de la plaque. Elle stérilise l'anse, la refroidit et inocule une seconde section adjacente de la plaque en faisant glisser la boucle à travers la première section plusieurs fois et couvrant la deuxième section à l'aide d'un zigzag mouvement. Cela ramasse un petit nombre de bactéries de la première section et les transfère à la deuxième section. Le nombre de fois que cette procédure de base est répétée dépend de la méthode de la plaque à stries utilisée. Malgré la méthode, l'échantillon original est utilisé pour ensemencer la première section de la plaque seulement.
Méthode de la plaque striée
Les méthodes de plaques striées varient selon le nombre de sections de gélose striées. La méthode T-streak utilise trois sections: la moitié supérieure et deux sections inférieures de taille égale. L'inoculum initial est placé dans la moitié supérieure de la plaque. Les bactéries sont traînées de la section supérieure à l'une des sections inférieures, puis de cette section inférieure à l'autre. Dans la méthode des quadrants, quatre sections de taille égale sont striées. La méthode de stries continues consiste généralement à ensemencer la moitié supérieure de la plaque, à la faire pivoter de 180 degrés, et ensemencer l'autre moitié de la plaque sans stériliser l'anse ni entraîner de bactéries de la précédente section.