Technique pour séparer les bactéries dans une culture mixte

Microbiologistes, généticiens et biologistes moléculaires utilisent des cultures bactériennes pour découvrir les secrets de la vie. Les microbiologistes étudient les bactéries pour découvrir de nouveaux antibiotiques pour traiter les infections. Les généticiens utilisent des bactéries pour déterminer si les produits chimiques peuvent avoir des propriétés cancérigènes. Les biologistes moléculaires étudient les voies biochimiques des processus cellulaires pour comprendre les fonctions des enzymes que nous avons en commun avec les bactéries. Aussi variées que soient les études, les trois sciences isolent les cultures bactériennes en utilisant la même technique: le stries sur plaque de gélose.

Notions de base sur les microbes

De nombreuses bactéries ont des formes distinctives qui facilitent la classification.

•••Chad Baker/Photodisc/Getty Images

Les microbes sont des organismes unicellulaires tels que les bactéries et les champignons. Ces organismes se reproduisent rapidement et sont faciles à cultiver, ce qui les rend particulièrement utiles à étudier. Lorsqu'un microbe potentiellement nouveau est découvert dans la nature, un échantillon est placé dans un milieu de croissance appelé « bouillon ». Bouillons se composent d'eau stérilisée, de sels, de sucres et d'autres nutriments qui favoriseront la croissance bactérienne rapide dans un flacon pendant incubation. Cependant, le plus souvent, le bouillon contiendra plus d'un type de bactéries. Pour isoler une seule bactérie, le scientifique étalera un petit échantillon du bouillon sur une plaque de gélose semi-solide en utilisant une technique microbienne appelée "strie".

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Plaques de gélose

Le port de gants lors de la manipulation des plaques de gélose empêche les bactéries de vos mains de contaminer votre échantillon.

•••Comstock/Comstock/Getty Images

Les plaques de gélose sont des gels semi-transparents et semi-solides constitués d'algues et de concentrations spécifiques de nutriments. L'utilité de la gélose réside dans le fait qu'elle fournit une surface lisse et douce pour la croissance des bactéries. Lorsqu'un scientifique place une seule bactérie sur de la gélose, elle se reproduira en se doublant des milliers de fois et apparaîtra comme une petite colonie de cellules individuelles.

Outils de Stries de Bactéries

Les outils de base pour strier les colonies bactériennes n'ont pas changé depuis la découverte de la technique.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

La strie bactérienne nécessite trois outils: une plaque de gélose, un brûleur à alcool et une boucle métallique. La plaque de gélose est le milieu de croissance vers lequel les bactéries sont transférées après la croissance en bouillon. Le brûleur à alcool est une petite lampe remplie d'alcool pour stériliser la boucle de fil - une longue poignée mince avec une petite boucle de fil résistant au feu attachée à une extrémité. La boucle contiendra une minuscule goutte de bouillon rempli de bactéries lors du transfert des bactéries du bouillon à la plaque de gélose.

Processus de stries bactériennes

Un mouvement en zigzag est le moyen le plus efficace de propager les bactéries sur une plaque de gélose.

•••Hemera Technologies/Photos.com/Getty Images

Les bactéries striées sur une plaque de gélose sont simples, mais vous devez effectuer cette étape correctement ou vous n'isolerez pas des colonies séparées. Chauffer la boucle sur le brûleur à alcool pour stériliser le fil, puis tremper la pointe de la boucle dans le bouillon. Strie la pointe de la boucle d'avant en arrière plusieurs fois sur un quart de la plaque de gélose. Stérilisez à nouveau la boucle et faites des stries transversales et perpendiculaires aux premières stries. Déplacez la boucle d'avant en arrière plusieurs fois sur une nouvelle section de la plaque. Stérilisez la pointe. strie légèrement sur la dernière section striée une fois et déplacez la boucle d'avant en arrière plusieurs fois. Les stries diluent la goutte initiale de bouillon à un point où les dernières stries contiendront des colonies uniques. Placer la plaque dans un incubateur ou sur une table à température ambiante et attendre que les colonies se développent pendant la nuit. Les colonies isolées de la dernière série deviendront des colonies isolées d'une seule bactérie.

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