Puskuriliuokset vastustavat pH: n muutoksia, koska ne sisältävät heikkoja happo-emäs-konjugaatteja, jotka neutraloivat H + ja OH- ioneja. Puskuriliuokset koostuvat heikoista hapoista tai emäksistä ja kyseisen hapon tai emäksen suolasta. Sopivan puskurijärjestelmän valinta riippuu puskuroinnin pH-alueesta. Suurin osa biologisista reaktioista tapahtuu pH-alueella 6-8. Fosfaattipuskuripuskuri pH-alueella 6,5 - 7,5. Karboksyylihappopuskurit ovat käyttökelpoisia välillä pH 3 - 6. Boraattipuskurit toimivat pH-arvossa 8,5-10. Aminohappopuskurit, kuten glysiini ja histidiini, suorittavat erilaisia pH-alueita. Tris-puskuri on yksi biologian laboratorioiden yleisimmin käytetyistä puskurijärjestelmistä. Tris-puskuriliuoksen laskelmia käytetään seuraavassa esimerkissä, mutta menetelmä soveltuu mihin tahansa puskuriliuokseen.
Käytä lopullisen liuoksen molaarisuuden ja tilavuuden tulosta määrittämällä tarvittavat emäsmoolit. Esimerkiksi, jos tarvitaan 2 litraa 0,1 M Tris-puskuriliuosta, vaadittu Tris-moolien määrä on:
Laske tarvittavan puskurin massa kertomalla tarvittavien moolien määrä emäksen molekyylipainolla. Esimerkiksi 0,2 moolin Tris-emäksen massa on:
Liuotetaan pohja tislattuun veteen käyttämällä magneettista sekoitussauvaa ja sekoituslevyä. Liuotetaan se vesitilavuuteen vain hieman pienempi kuin lopullinen liuoksen tilavuus (950-9715 ml jokaista litraa lopullista liuosta kohti). Tris-puskurin pH muuttuu konsentraation myötä ja se on säädettävä uudelleen, jos käytetään liian pientä alkutilavuutta. On myös parasta valmistaa puskuri samassa lämpötilassa, jota käytetään määrityksen tai kokeen aikana, koska Tris: llä on suuria lämpötilasta riippuvia pH-muutoksia.
Vinkkejä
- Voit säästää aikaa puskuriliuoksen valmistuksessa käyttämällä valmiita puskurikonsentraatteja vaaditussa pH: ssa ja laimentamalla halutulle molaarisuudelle ja tilavuudelle. Valmista puskuriliuos samassa lämpötilassa kuin sitä käytetään merkittävien pH-muutosten välttämiseksi. Vältä aikaa vieviä pH-säätöjä, titraa vasta laimennuksen jälkeen haluttuun pitoisuuteen. Liukeneminen liian pieneen tilavuuteen johtaa toistuviin titrauksiin.
Varoitukset
- Ole varovainen käsitellessäsi happoja ja emäksiä. Käytä suojalaseja.
kirjailijasta
Carla Boulianne on koulutukseltaan evoluutiobiologi ja intohimoisesti freelance-kirjailija. Sen lisäksi, että hän on kirjoittanut Demand Studiosille ja eHow'lle, hän on myös Su101.com-lehden vanhempien lahjakirjan kirjoittaja. Hän innostaa tutkimaan uusia aiheita laajalla tutkimuksella.
Valokuvahyvitykset
Kuva: Emmi P. @ morgueFile.com