Western blot test, mida nimetatakse ka immunoblotiks, on valgusegus sisalduva spetsiifilise valgu test. Western blot test viiakse läbi pärast geelelektroforeesi või ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) testi ja spetsiifiliste valkude tuvastamiseks kasutatakse antikehi.
Naatriumdodetsüülsulfaadi polüakrüülamiidgeelelektroforees (SDS-PAGE) on levinud test, mida kasutatakse valkude eraldamiseks Western blot'is kasutamiseks. Valgud on geeli maatriksi liikumisel eraldatud massi ja elektriliste omaduste järgi.
ELISA testis kasutatakse testpinna loomiseks tahke pinna külge kinnitatud ensüüme või antikehi. Seejärel lisatakse proov proovipinnale. Antikehad või ensüümid, mis reageerivad valkudega või kinnituvad valkudele, näitavad positiivset tulemust.
Western blot test viiakse läbi pärast geelelektroforeesi. Eraldatud valgud kantakse (või blotitakse) nitrotselluloosi või nailonmembraanidele ja identifitseeritakse sekundaarsete valkudega märgistatud spetsiifiliste antikehade abil.
Western blot testi kasutatakse kas geelelektroforeesi või ELISA testide positiivsete tulemuste kinnitamiseks. Western blot test võimaldab valke täpsemalt tuvastada ja välistada valepositiivseid tulemusi.