Erinevate ühendite eraldamiseks ja tuvastamiseks on palju meetodeid. Kromatograafia on teadus, mis võimaldab teil segu komponente eraldada. The Rf (mõnikord mitteametlikult kirjutatud kui "rf väärtus") on osa sellest.
Kromatograafiat on palju erinevaid. Siin on fookuses kõige lihtsam kromatograafia liik: paberikromatograafia või õhekihikromatograafia (TLC). Mõlemad kasutavad sama üldist protseduuri, mida kirjeldatakse allpool.
Mida kromatograafia hõlmab?
Kõigil kromatograafiatüüpidel on a statsionaarne faas ja a mobiilne faas. Statsionaarne faas, nagu võite nime järgi arvata, ei liigu. Paberkromatograafias on statsionaarne faas paber ise.
Ühendite eraldamise alustamiseks punktiiritakse analüüsitav aine paberitüki alumisele servale. Seejärel pannakse paber keeduklaasi, mis sisaldab liikuvat faasi, mis on lahusti. Lahusti peaks olema punkti all, kus analüüsitav aine on punktiir. See ei tohiks analüüdi uputada.
Vedelik liigub kapillaaride abil paberit ülespoole. Kui analüüd või selle osa meelitatakse liikuvasse faasi, siis see liigub koos sellega. Kui sellel on statsionaarse faasi jaoks tugevam külgetõmme, siis see ei liigu.
Pärast seda, kui lahusti on liikunud statsionaarses faasis mingil määral ülespoole, on teil kromatogramm. See kromatogramm räägib teile midagi erinevate komponentide eraldamisest segus või räägib sellest, milline aine teil on. Kuidas?
Komponentide eraldamine ja tuvastamine kromatogrammi abil
Kui kromatogrammi väljatöötamise tingimused on samad, peaks konkreetse aine liikumise kaugus muutuma. Seda kaugust mõõdetakse retentsiooniteguri valem või Rf.
Retentsiooniteguri valem on:
Kui kromatogramm on samal viisil välja töötatud, peaks see väärtus olema aine jaoks sama.
See on kasulik, kui teil on ainete segu.
Oletame näiteks, et teil on neli proovi: kolm on standardid ja üks segu. Teie ülesandeks on kindlaks teha, millised komponendid segus on.
Mis on standardid? Standardid on puhas aine proov. Seda saab võrrelda kromatogrammil.
Segu saab käivitada, mille järel saate määrata, kui kaugel erinevad komponendid selles töötavad.
Oletame, et standardil nr 1 on tugev afiinsus vee (liikuva faasi) suhtes. See tähendab, et see liigub koos mobiilse faasiga paberil ülespoole. Standardil nr 2 on seevastu tugev afiinsus paberi suhtes. See tähendab, et see jääb statsionaarsesse faasi. Lõpuks on standardil nr 3 afiinsus nii vee kui ka paberi suhtes. Ennustate, et see liigutab vahesummat.
Leiate, et lahusti liigub 5,7 cm, standard # 1 liigub 0,5 cm, standard # 2 4,8 cm ja standard # 3 2,9 cm. Mis on Rf väärtused iga standardi jaoks?
Nüüd teate R-df standardite väärtused. Järgmiseks asetage teisele paberile segu täpp ja lasete kromatogrammil areneda, asetades selle vette.
Pärast eemaldamist leiate, et on kaks punkti, mis eraldasid teie esialgsest punktist. See tähendab tõenäoliselt, et teie segus on ainult kaks komponenti. Järgmisena peate välja selgitama, millistele standarditele need kaks komponenti vastavad. Selleks mõõdate Rf väärtused.
Lahusti liikus 4,5 cm. Üks komponent (nn komponent 1) liikus 2,2 cm ja teine 3,9 cm (nn komponent 2). Et näha, millisele standardile need komponendid vastavad, peate R arvutamiseks kasutama retentsiooniteguri valemitf väärtused.
Arvestades neid Rf väärtused, on tõenäoline, et komponent 1 vastab standardile nr 3, kuna Rf väärtused on väga sarnased. 2. komponent on tõenäoliselt standard nr 2.