Kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) on laboritehnika, mida kasutatakse ühendite eraldamiseks ja identifitseerimiseks. See on kolonnkromatograafia tüüp, mis tugineb lahuste ühendite erinevale polaarsusele nende eraldamiseks. HPLC erineb standardsest kolonnkromatograafiast, kuna see kasutab survet, et lahus kiiremini läbi kolonni suruda ja annab seetõttu kiiremad ja mõnikord ka täpsemad tulemused. Eesmärk on ühendid veerus eraldada ja lasta neil eraldi väljuda.
HPLC kiiruse ja sõltuvuse tõttu ühendite erinevast polaarsusest on kaks ühendit sarnane struktuur ja polaarsus võivad kromatograafiaaparaadist väljuda korraga või peaaegu samad aeg. Seda nimetatakse koelutsiooniks. Koelutsioon raskendab täpselt, milline segu segu millisel hetkel elueeritakse.
HPLC kasutab tavaliselt klaasist kolonni, mis on täidetud erinevatest materjalidest helmestega. Kolonni kaudu läbi surutud segudel on kemikaalid, mis seonduvad helmestega erineva tugevusega. Seondumise tugevus, mis sõltub polaarsuse sarnasusest, määrab kindlaks, kui kaua kemikaal enne vabanemist helmega seondub. Mõned ühendid seonduvad nii tugevalt, et neid ei eraldu kunagi kolonni helmestest ja neid ei mõõdeta kunagi sambast väljuvas lahuses.
Tüüpilised laboratoorsed eraldamismeetodid hõlmavad testi või eraldamismeetodi väljatöötamist ja seejärel selle testi rakendamist üksikute ühendite lahusest eraldamiseks. Kuid selle tulemuseks on tavaliselt mitu lahendust, mis peavad samuti läbima protseduurid, mis põhjustab keerukuse hüppelist kasvu. Kuigi HPLC võib seda protsessi sageli lihtsustada ja kiirendada, võivad HPLC-aparaadi väljatöötamise kulud muutuda tohutuks. Kuigi HPLC-aparatuuri väljatöötamine on palju tõhusam, on see palju kulukam kui muude ühendite eraldamiseks vajalike testide väljatöötamine. Seetõttu ei ole see paljude väikeste eraomanduses olevate laborite jaoks rahaliselt tasuv.
HPLC-d ei kasutata mitte ainult lihtsate ühendite eraldamiseks, vaid ka spetsiifiliste valkude isoleerimiseks rakusegust. Sellisel juhul on veerus olevad helmed tavaliselt kaetud antikehaga, mis on spetsiifiline valgule, mida peate koguma. Valgud seovad antikehad ja ülejäänud lahus lastakse läbi kolonni, seejärel vabastatakse valgud teise lahuse abil ja kogutakse. Selleks on vaja kõrgelt kvalifitseeritud tehnikut, kes jälgiks veergu pidevalt ja veenduks, et protsess töötab täpselt plaanipäraselt.