Aunque no se pueden ver a simple vista, las bacterias están en todas partes. Existen en los alimentos, el suelo, el agua, las superficies dentro de nuestros hogares y dentro y sobre nuestros cuerpos. Las bacterias generalmente existen en poblaciones mixtas. El aislamiento de una bacteria específica de otras especies bacterianas en una muestra determinada permite a los microbiólogos estudiar su estructura y función, características utilizadas en su identificación. Los microbiólogos con frecuencia aíslan las bacterias mediante una de varias técnicas de placas de rayas.
Herramientas
Se utiliza un asa de inoculación para transferir microorganismos. Consiste en un alambre de nicromo o platino con un pequeño lazo circular en un extremo. El otro extremo es recto y se desliza en un asa. También se encuentran disponibles bucles de inoculación de plástico desechables. Las bacterias solo se pueden aislar si crecen. Los microbiólogos cultivan bacterias para el aislamiento de placas de rayas en placas de Petri redondas y poco profundas llenas de un medio sólido, llamado agar. El agar imita el entorno en el que las bacterias crecen de forma natural. Los platos llenos de medios están esterilizados y tapados para evitar el crecimiento de organismos no deseados. Durante el aislamiento de la placa de rayas, el asa de inoculación se esteriliza repetidamente en la llama de un mechero Bunsen.
Principio
La técnica de la placa de rayas es el método más popular para aislar bacterias específicas de una muestra que contiene una mezcla de microorganismos. La técnica esencialmente diluye el número de organismos y reduce su densidad. Permite a los microbiólogos distinguir y aislar colonias bacterianas individuales. Una colonia es un grupo visible de bacterias. Todas las bacterias de una sola colonia se originan en la misma célula bacteriana. En consecuencia, las colonias individuales son colonias "puras". La colonia pura se transfiere a otra placa para producir un cultivo puro que consta de un tipo de bacteria.
Procedimiento
Cuando se realiza correctamente, el aislamiento de placas en estrías adelgaza una muestra y permite que las células bacterianas individuales se desarrollen en colonias aisladas. Un microbiólogo comienza esterilizando el asa de inoculación en una llama. Ella enfría el asa tocándola con el agar, luego sumerge el asa en la muestra y la extiende hacia adelante y hacia atrás para cubrir una sección de la placa. Ella esteriliza el asa, lo enfría e inocula una segunda sección adyacente de la placa arrastrando el bucle a través de la primera sección varias veces y cubriendo la segunda sección en zigzag movimiento. Esto recoge una pequeña cantidad de bacterias de la primera sección y las transfiere a la segunda sección. El número de veces que se repite este procedimiento básico depende del método de placa de rayas utilizado. A pesar del método, la muestra original se utiliza para inocular solo la primera sección de la placa.
Método de estriado en placa
Los métodos de placas de rayas varían según el número de secciones de agar rayadas. El método de la racha en T utiliza tres secciones: la mitad superior y dos secciones inferiores del mismo tamaño. El inóculo inicial se coloca en la mitad superior de la placa. Las bacterias se arrastran desde la sección superior a una de las secciones inferiores, luego desde esa sección inferior a la otra. En el método del cuadrante, se rayan cuatro secciones del mismo tamaño. El método de rayado continuo generalmente implica inocular la mitad superior de la placa, girándola 180 grados, e inocular la otra mitad de la placa sin esterilizar el asa ni arrastrar bacterias de la anterior sección.