La prueba de Western blot, también llamada inmunotransferencia, es una prueba para una proteína específica dentro de una mezcla de proteínas. La prueba de Western blot se realiza después de la electroforesis en gel o una prueba de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), y utiliza anticuerpos para identificar proteínas específicas.
La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (SDS-PAGE) es una prueba común que se usa para separar proteínas para su uso en la transferencia Western. Las proteínas se separan por peso y propiedades eléctricas a medida que se mueven a través de una matriz de gel.
La prueba ELISA usa enzimas o anticuerpos adheridos a una superficie sólida para crear la superficie de prueba. Luego se agrega una muestra a la superficie de prueba. Los anticuerpos o enzimas que reaccionan o se unen a proteínas indican un resultado positivo.
La prueba de Western blot se realiza después de la electroforesis en gel. Las proteínas separadas se transfieren (o se transfieren) a membranas de nitrocelulosa o nailon y se identifican mediante anticuerpos específicos que están marcados por una proteína secundaria.
La prueba de Western blot se utiliza para confirmar los resultados positivos de las pruebas de electroforesis en gel o ELISA. La prueba de Western blot puede identificar proteínas de manera más específica y puede descartar falsos positivos.