Cómo realizar una prueba de esporas en un autoclave

Es fundamental realizar una prueba de esporas en un autoclave para asegurarse de que el autoclave esteriliza correctamente el equipo. Pruebas de esporas, también conocidas como pruebas de indicadores biológicos, pruebe si las cepas de esporas bacterianas altamente resistentes sobreviven al proceso de esterilización.

Los autoclaves pueden fallar debido a fallas mecánicas o errores del operador, lo que hace que los microorganismos sobrevivan. Todos los operadores de autoclaves deben estar familiarizados con el uso de pruebas de indicadores químicos y de esporas.

Propósito de la esterilización

La esterilización es el proceso en el que microorganismos se matan para evitar su crecimiento y propagación. Al matar todos los microorganismos, uno puede estar seguro de que el equipo u objeto está limpio y seguro para su uso en el próximo proyecto. La esterilización se considera una de las precauciones estándar que se utilizan para prevenir la transmisión de bacterias, virus y otros microbios.

Diferentes industrias utilizan la esterilización para lograr diferentes objetivos. Las industrias de la salud esterilizan equipos para prevenir la propagación de enfermedades entre pacientes. Las industrias alimentarias esterilizan para prevenir el crecimiento de bacterias dañinas que causan enfermedades. Los laboratorios de investigación utilizan la esterilización para evitar la contaminación cruzada entre muestras.

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Esterilización vs. Desinfección

El propósito tanto de la esterilización como de la desinfección es limpiar objetos matando microorganismos. La desinfección mata a la mayoría de los microorganismos, excepto a las cosas altamente resistentes como las esporas bacterianas.

Para que un proceso o sustancia se clasifique como esterilización, todos los microorganismos deben ser eliminados.

Esporas bacterianas altamente resistentes

Las esporas bacterianas se forman cuando las condiciones ambientales no son adecuadas, a diferencia de las esporas de hongos, que son parte del proceso reproductivo. Mantienen seguro el material genético (ADN) de las células bacterianas hasta que las condiciones mejoren y haya suficiente agua y nutrientes para que las bacterias sobrevivan.

Tres capas, la pared de esporas, la corteza y el revestimiento exterior de queratina, protegen el ADN, que está contenido en una membrana citoplasmática en el centro de la espora. Algunas esporas bacterianas tienen enzimas como catalasa resistente al calor que brindan protección adicional a las esporas bacterianas para mantenerlas vivas durante años.

Tipos de esterilización

Las formas más comunes de esterilizar objetos son el uso de calor o el uso de productos químicos como el glutaraldehído. Dependiendo del objeto que se esterilice, a menudo es preferible usar esterilizadores térmicos porque los esterilizadores químicos suelen ser altamente tóxicos y corrosivos.

Los esterilizadores de calor utilizan calor seco o vapor con temperaturas máximas superiores a 250 grados Fahrenheit (121 grados Celsius) para matar microorganismos. Los autoclaves utilizan el método de calentamiento por vapor y son el método de esterilización más utilizado en el mundo.

Esterilización en autoclave

Los autoclaves funcionan eliminando todo el aire de la cámara central y reemplazándolo con vapor caliente usando una bomba de vacío o un método de desplazamiento. Luego, los objetos dentro del autoclave se calientan a alrededor 270 grados Fahrenheit (132 grados Celsius) durante aproximadamente 20 minutos.

Este proceso genera altas presiones dentro del autoclave. La forma cilíndrica, el mecanismo de bloqueo externo y la válvula de seguridad ayudan a la máquina a manejar la presión.

Proceso de autoclave de prueba de esporas

Se recomienda realizar pruebas de esporas cada semana para garantizar que el autoclave funcione correctamente. Las pruebas de esporas contienen esporas bacterianas no patógenas de especies como Geobacillus stearothermophilus ya sea en un vial o impregnado en papel de filtro. Es fundamental seguir las instrucciones del fabricante de la prueba de esporas.

El proceso de prueba es tan simple como colocar la prueba en el autoclave entre otros instrumentos y ejecutar un ciclo como de costumbre. Se recomienda mover la ubicación de los kits de prueba de autoclave químico y biológico alrededor de la cámara para identificar si hay áreas que no están siendo tratadas adecuadamente.

La tira reactiva o el vial se pueden enviar para su análisis o colocar en una incubadora en el lugar para cultivar cualquier bacteria que haya sobrevivido. Si las bacterias crecían, la esterilización no se completaba.

Interpretación de resultados

Es importante señalar que un resultado negativo no prueba necesariamente que la esterilización funcionó correctamente, pero un resultado positivo demuestra que algo salió mal.

Un resultado positivo podría deberse a una serie de problemas, como fallas mecánicas, sobrecarga de la cámara con equipos, configuraciones incorrectas o interrupciones durante el ciclo. En caso de un resultado positivo, se deben implementar procesos de esterilización alternativos hasta que se resuelva el problema.

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