Durante la cromatografía de capa fina, un técnico coloca manchas de una mezcla química en una placa plana cubierta con una capa de material absorbente, luego coloca la parte inferior de la placa en disolvente. A medida que el solvente sube por la placa, los químicos de la mezcla se mueven con él a diferentes velocidades, por lo que se separan. Esta prueba determina qué sustancias químicas se encuentran en una mezcla comparando las tasas de viaje de las incógnitas con los estándares conocidos. Sin embargo, los resultados pueden verse afectados por muchos factores.
TL; DR (demasiado largo; No leí)
Los valores del factor de retención en la cromatografía en capa fina se ven afectados por el absorbente, el disolvente, la propia placa cromatográfica, la técnica de aplicación y la temperatura del disolvente y la placa.
Factores de retención
El factor de retención de una sustancia química durante la cromatografía en capa fina es una medida de cuánto se mueve hacia arriba en la placa en respuesta al movimiento del disolvente. Dado que el movimiento absoluto de la sustancia química depende de la distancia que recorra el disolvente, se calculan los valores del factor de retención en relación con el grado de movimiento del disolvente. El factor de retención de una sustancia química es la distancia vertical que mueve la sustancia química desde el lugar donde se encontraba. aplicado originalmente a la placa, dividido por la distancia recorrida por el solvente - medida desde el mismo inicio punto.
Placa de cromatografía de capa fina
La propia placa de cromatografía de capa fina puede afectar el valor del factor de retención obtenido para una determinada sustancia química. Las placas de cromatografía de capa fina se pueden recubrir con una variedad de sólidos absorbentes; más frecuentemente sílice o alúmina. Dado que el factor de retención se basa en la afinidad relativa del producto químico por el absorbente en comparación con el disolvente, cambiar el absorbente puede cambiar en gran medida el factor de retención. Además, el grosor y la uniformidad de la capa de absorbente pueden variar de un plato a otro, especialmente si son hechos a mano. Estos factores también pueden cambiar el valor del factor de retención de los productos químicos.
Factores de retención de impactos de solventes
Dado que el disolvente lleva el producto químico a la placa, el disolvente particular utilizado también tendrá un impacto sustancial en el valor del factor de retención del producto químico. Un solvente que tiene una interacción más fuerte para un químico en particular superará más fácilmente cualquier afinidad del producto químico por la capa absorbente, y mover ese producto químico más lejos en un período dado de hora. Las mezclas de solventes también pueden tener diferentes efectos dependiendo de la proporción de cada solvente.
Otros factores
Hay algunos otros factores que pueden afectar el factor de retención en algunos casos. La temperatura del solvente y la placa puede sufrir ligeros cambios, ya que, por ejemplo, el solvente a menudo puede disolver mejor los productos químicos que transporta a temperaturas más altas. La técnica del técnico al aplicar la muestra a la placa también puede cambiar el factor de retención. La aplicación de demasiada muestra puede resultar en bandas grandes y difusas de producto químico que se mueven hacia arriba de la placa, lo que dificulta medir con precisión la distancia que se ha transportado el producto químico.