Enterobacter aerogenes y otras especies de Enterobacteriaceae son fáciles de identificar con el kit de prueba API-20E. Este kit, fabricado por bioMeriuex Inc., incluye 20 minitubos o pocillos para la prueba. La prueba consiste en inocular una suspensión bacteriana pura en los pocillos de prueba y leer las reacciones de color que ocurren. La identificación se basa en convertir los resultados de estas reacciones de color en un código de siete dígitos conocido como Índice de perfil analítico. Hacer coincidir este código con la base de datos del fabricante proporciona una identificación del organismo.
Abra una ampolla que contenga 5 ml de cloruro de sodio al 0,85 por ciento de medio. Retire una sola colonia de una placa de aislamiento de 18 a 24 horas con una pipeta y agréguela a la ampolla. Mezclar para obtener una suspensión homogénea. Utilice esta suspensión tan pronto como termine de prepararla.
Instale una caja de incubación que consta de pocillos en forma de panal en una bandeja con tapa. Abra la caja y agregue 5 ml de agua desmineralizada o destilada en los pozos de la bandeja. Desembale la tira provista en el kit de prueba API 20E y colóquela en la caja de incubación.
Llene el tubo y la cúpula de los pocillos marcados "GEL", "VP" y "CIT" con la suspensión que ha preparado. En los pocillos restantes, llene la suspensión bacteriana en el tubo, pero no en la cúpula. Agregue aceite mineral en los pozos marcados como "ADH", "ODC", "LDC", "URE" y "H2S" para crear un ambiente anaeróbico.
Cubra la caja de incubación con la tapa e incube a una temperatura entre 34 y 38 grados Celsius durante 18 a 24 horas.
Observe los pozos y anote las reacciones en la hoja de resultados. Siempre que un mínimo de tres pruebas sean positivas, proceda a las reacciones de color utilizando las soluciones de prueba química o los reactivos que vienen con el kit. Agregue una gota de reactivo TDA en el pozo marcado como "TDA" y una gota de cada uno de los reactivos VP1 y VP2 en el pozo marcado "VP". Si menos de tres pruebas dieron positivo, incube las tiras durante otras 24 horas antes de agregar estas reactivos.
Observe los cambios de color producidos en los pozos. Un color marrón rojizo en TDA indica una reacción positiva. Espere 10 minutos después de agregar los reactivos del kit en VP1 y VP2. Considere un color rojo o rosa como positivo y un color rosa pálido que aparece después de 10 minutos como negativo.
Realice la prueba de oxidasa según lo especificado por el fabricante del kit y registre sus resultados junto con los resultados de las 20 pruebas anteriores.
Introduzca este número de perfil de siete dígitos en la base de datos del fabricante del kit a través de un teléfono de marcación por tonos. Espere a recibir la identificación proporcionada por la base de datos. Si el número de perfil no proporciona resultados específicos, realice las pruebas complementarias especificadas por el fabricante del kit.