Η μικροβιολογία είναι η μελέτη μικροοργανισμών: μικροσκοπικές ή σχεδόν ορατές μονοκύτταρες μορφές ζωής όπως βακτήρια, αρχαία, πρωτόζωα και μερικούς μύκητες, ακόμη και μερικά εξαιρετικά μικρά πολυκύτταρα φυτά, ζώα και μύκητες. Οι μικροβιολόγοι μελετούν επίσης μη βιολογικά φαινόμενα όπως ιούς, πρίον, ιοειδή και βιριόνια. Το "Microbe" είναι ένας γενικός όρος για όλες αυτές τις οντότητες. Η απαρίθμηση στη μικροβιολογία είναι ο προσδιορισμός του αριθμού των μεμονωμένων βιώσιμων μικροβίων σε ένα δείγμα. τέσσερις βασικές τεχνικές είναι δυνατές.
Μετρώντας πολιτισμούς
Ένα άμεσο μέτρο για τη μικροβιακή απαρίθμηση είναι ο τυπικός αριθμός πλακών, που ονομάζεται επίσης βιώσιμος αριθμός. Για αυτό μετράτε καλλιεργείτε ένα δείγμα αραιώνοντάς το, τοποθετώντας το σε πλάκες μέσου καλλιέργειας και επωάζοντάς τα για ένα καθορισμένο χρονικό διάστημα. Στη συνέχεια μετράτε τους αριθμούς των αποικιών και χρησιμοποιείτε αυτόν τον αριθμό για να εξαγάγετε τον αρχικό αριθμό μικροβίων στο δείγμα. Από τεχνικής απόψεως, η μέτρηση της πλάκας δεν δίνει τον αριθμό των μεμονωμένων μικροβίων, αλλά μάλλον "σχηματισμό αποικιών μονάδες, "επειδή δεν μπορείτε να ξέρετε με βεβαιότητα εάν κάθε αποικία προήλθε πραγματικά από ένα μικρόβιο ή από μια μικρή ομάδα μικρόβια. Ωστόσο, αυτές οι μετρήσεις θεωρούνται πολύ ακριβείς για τον υπολογισμό του αριθμού των μικροβίων στα αρχικά δείγματα. Μειονεκτήματα είναι ότι αυτή η δοκιμή είναι χρονοβόρα και χρονοβόρα και απαιτεί εξειδικευμένο εξοπλισμό που πρέπει να προετοιμαστεί σωστά.
Μεμονωμένες μετρήσεις
Οι άμεσες μικροσκοπικές μετρήσεις, που ονομάζονται επίσης συνολικοί αριθμοί κυττάρων, είναι μια άλλη μορφή άμεσης απαρίθμησης. Πρώτα χωρίζετε ένα δείγμα σε έναν αριθμό θαλάμων ίσου μεγέθους. Στη συνέχεια, καθορίζετε τον μέσο αριθμό μικροβίων ανά θάλαμο μετρώντας μερικά ή όλα κάτω από ένα μικροσκόπιο. Τέλος, χρησιμοποιείτε αυτόν τον μέσο όρο για να υπολογίσετε τον αριθμό στην αρχική μονάδα. Το σημαντικότερο μειονέκτημα για τις άμεσες μικροσκοπικές μετρήσεις είναι ότι είναι δύσκολο να διακρίνουμε τα ζωντανά μικρόβια από τα νεκρά, επομένως αυτή η μέθοδος μπορεί να μην παρέχει ακριβή βιώσιμη απαρίθμηση.
Ακτίνες φωτός, σύννεφα μικροβίων
Οι δοκιμές θολότητας είναι μορφές έμμεσης απαρίθμησης. Η θολότητα είναι η θολότητα ενός υγρού. Στη θολομετρική μέτρηση βάζετε ένα δείγμα σε διάλυμα, μετρήστε τη θολερότητα της νέας λύσης λάμποντας φως μέσα από αυτό με ένα φασματοφωτόμετρο, στη συνέχεια υπολογίστε τον αριθμό των ζωντανών μικροβίων που θα χρειαζόταν για να παραχθεί το παρατηρούμενο επίπεδο θολερότητας. Το μειονέκτημα εδώ είναι ότι κάποιος πρέπει να έχει ήδη κάνει πολλές τυπικές μετρήσεις πλακών του εν λόγω μικροβίου για να κάνετε δείγματα λύσεων διαφορετικής θολότητας, έτσι ώστε να έχετε ένα πρότυπο για τη μέτρηση του τρέχοντος δείγματος σας κατά. Πρέπει επίσης να προσέχετε την υπερβολική συγκέντρωση του δείγματος σας, επειδή μια θολερομετρική μέτρηση είναι ακριβής μόνο εάν κανένα μικρόβιο στο δείγμα δεν εμποδίζει κανένα άλλο. Σε μια οπτική σύγκριση θολότητας συγκρίνετε τη θολότητα του δείγματος σας με τη θολότητα μιας μονάδας του ίδιου μεγέθους και του γνωστού μικροβιακού αριθμού και υπολογίζετε μια απαρίθμηση βάσει αυτής της σύγκρισης.
Έμμεσα αποτελέσματα
Δύο άλλες μορφές έμμεσης απαρίθμησης είναι ο προσδιορισμός μάζας και η μέτρηση της μικροβιακής δραστηριότητας. Για απαρίθμηση μαζικού προσδιορισμού, ζυγίζετε την ποσότητα βιολογικής ύλης στο δείγμα σας, συγκρίνετε αυτήν βάρος σε μια τυπική καμπύλη για γνωστές μικροβιακές μετρήσεις και εκτιμήστε τον αρχικό μικροβιακό αριθμό από αυτό σύγκριση. Για μια μέτρηση μικροβιακής δραστηριότητας μετράτε την ποσότητα ενός βιολογικού προϊόντος στο δείγμα σας, όπως μεταβολικά απόβλητα και, στη συνέχεια, συγκρίνετε αυτό με μια τυπική καμπύλη για γνωστές μετρήσεις και υπολογίστε την απαρίθμησή σας από αυτό σύγκριση.