Obwohl sie mit bloßem Auge nicht zu sehen sind, sind Bakterien überall. Sie kommen in Nahrung, Boden, Wasser, Oberflächen in unseren Häusern und in und auf unserem Körper vor. Bakterien kommen im Allgemeinen in gemischten Populationen vor. Die Isolierung eines bestimmten Bakteriums aus anderen Bakterienarten in einer bestimmten Probe ermöglicht es Mikrobiologen, seine Struktur und Funktion zu untersuchen, die bei seiner Identifizierung verwendet werden. Mikrobiologen isolieren häufig Bakterien mit einer von mehreren Streak-Plate-Techniken.
Werkzeuge
Eine Impföse wird verwendet, um Mikroorganismen zu übertragen. Es besteht aus einem Nichrom- oder Platindraht mit einer kleinen, kreisförmigen Schlaufe an einem Ende. Das andere Ende ist gerade und gleitet in einen Griff. Einweg-Impfösen aus Kunststoff sind ebenfalls erhältlich. Bakterien können nur isoliert werden, wenn sie wachsen. Mikrobiologen züchten Bakterien zur Isolierung von Streakplatten in flachen, runden Petrischalen, die mit einem festen Medium, dem sogenannten Agar, gefüllt sind. Agar ahmt die Umgebung nach, in der die Bakterien natürlich wachsen. Die mit Medien gefüllten Schalen sind steril und haben einen Deckel, um das Wachstum unerwünschter Organismen zu verhindern. Bei der Streakplattenisolierung wird die Impföse wiederholt in der Flamme eines Bunsenbrenners sterilisiert.
Prinzip
Die Streak-Plate-Technik ist die beliebteste Methode, um bestimmte Bakterien aus einer Probe zu isolieren, die eine Mischung von Mikroorganismen enthält. Die Technik verdünnt im Wesentlichen die Anzahl der Organismen und verringert ihre Dichte. Es ermöglicht Mikrobiologen, einzelne Bakterienkolonien zu unterscheiden und zu isolieren. Eine Kolonie ist eine sichtbare Ansammlung von Bakterien. Alle Bakterien in einer einzigen Kolonie stammen aus derselben Bakterienzelle. Folglich sind einzelne Kolonien „reine“ Kolonien. Die reine Kolonie wird auf eine andere Platte übertragen, um eine Reinkultur zu erzeugen, die aus einer Bakterienart besteht.
Verfahren
Bei richtiger Durchführung verdünnt die Streak-Platten-Isolierung eine Probe und ermöglicht es einzelnen Bakterienzellen, sich zu isolierten Kolonien zu entwickeln. Ein Mikrobiologe beginnt mit der Sterilisation der Impföse in einer Flamme. Sie kühlt die Schleife, indem sie den Agar berührt, dann taucht sie die Schleife in die Probe und verteilt sie hin und her, um einen Abschnitt der Platte zu bedecken. Sie sterilisiert die Schlaufe, kühlt sie ab und inokuliert einen zweiten, angrenzenden Abschnitt der Platte durch Ziehen die Schleife mehrmals durch den ersten Abschnitt und den zweiten Abschnitt mit einem Zickzack abdecken Bewegung. Dieser nimmt eine kleine Anzahl von Bakterien aus dem ersten Abschnitt auf und überträgt sie in den zweiten Abschnitt. Wie oft dieses grundlegende Verfahren wiederholt wird, hängt von der verwendeten Streak-Plate-Methode ab. Trotz der Methode wird die Originalprobe nur zum Beimpfen des ersten Abschnitts der Platte verwendet.
Streak Plate-Methode
Die Ausstrichplattenmethoden variieren je nach Anzahl der ausgestrichenen Agarschnitte. Die T-Streak-Methode verwendet drei Abschnitte: die obere Hälfte und zwei gleich große untere Abschnitte. Das anfängliche Inokulum wird in die obere Hälfte der Platte platziert. Bakterien werden vom oberen Bereich in einen der unteren Bereiche gezogen und dann von diesem unteren Bereich in den anderen. Bei der Quadrantenmethode werden vier gleich große Abschnitte gestreift. Bei der kontinuierlichen Ausstrichmethode wird normalerweise die obere Hälfte der Platte geimpft, um 180 Grad gedreht, und Beimpfen der anderen Hälfte der Platte, ohne die Schlaufe zu sterilisieren oder Bakterien von der vorherigen zu ziehen Sektion.