Der Western-Blot-Test, auch Immunblotting genannt, ist ein Test auf ein bestimmtes Protein innerhalb einer Proteinmischung. Der Western-Blot-Test wird nach Gelelektrophorese oder einem ELISA-Test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) durchgeführt und verwendet Antikörper, um spezifische Proteine zu identifizieren.
Die Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) ist ein üblicher Test zur Trennung von Proteinen zur Verwendung im Western Blot. Die Proteine werden nach Gewicht und elektrischen Eigenschaften getrennt, während sie sich durch eine Gelmatrix bewegen.
Der ELISA-Test verwendet Enzyme oder Antikörper, die an einer festen Oberfläche befestigt sind, um die Testoberfläche zu erzeugen. Anschließend wird eine Probe auf die Testoberfläche gegeben. Antikörper oder Enzyme, die an Proteine reagieren oder an diese anlagern, zeigen ein positives Ergebnis an.
Der Western-Blot-Test wird nach der Gelelektrophorese durchgeführt. Die getrennten Proteine werden auf Nitrozellulose- oder Nylonmembranen übertragen (oder geblottet) und durch spezifische Antikörper identifiziert, die durch ein sekundäres Protein markiert sind.
Der Western-Blot-Test wird verwendet, um positive Ergebnisse entweder aus Gelelektrophorese- oder ELISA-Tests zu bestätigen. Der Western-Blot-Test kann Proteine genauer identifizieren und falsch positive Ergebnisse ausschließen.