Mikrobiologi studerer mikroskopiske organismer og har brug for måder at skelne mellem forskellige typer visuelt. Mikrobiologer bruger farvningsprocedurer, der tilføjer farve til forskellige typer organismer. Disse pletter er kemikalier, der har forskellige farver, men disse kemikalier holder sig ikke selv til organismerne. Således tilføjer en mikrobiolog en mordant til pletten. En mordant defineres klassisk som en ion, der binder et kemisk farvestof og holder det nede, således at farvestoffet forbliver fast på organismen. Imidlertid kan ethvert kemikalie, der holder et farvestof på plads, også betragtes som et mordant.
TL; DR (for lang; Har ikke læst)
En mordant "fikser" farvestoffet til organismen, så de farver holdes på plads.
Broen
I mikrobiologi er en mordant en forbindelse, der bruges til at holde molekyler af en plet nede på en mikroorganisme. Klassisk defineret er mordanter normalt ioner såsom metalioner eller halogenidioner, men kan være ethvert molekyle, der tjener formålet med at holde et farvestof nede. Imidlertid er et molekyle kaldet phenol en ikke-ionisk mordant, der diskuteres nedenfor. Nogle mordanter binder både farvestoffet og proteinerne på mikroorganismen. De fleste mordanter er ioner, fordi den elektriske ladning på ionen tiltrækker den elektriske ladning på et kemisk farvestof. Når ionen binder farvestoffet, danner de således et stort kompleks, der udfældes - hvilket betyder, at de bliver et fast stof og ikke længere opløses i opløsningen. Mordants holder farvestoffet nede eller vejer det ned, så det ikke skylles væk under resten af farvningsproceduren. Vask sker så kun de ægte farvningsregioner visualiseres.
Gramfarvning
En meget almindelig type farvning i mikrobiologi er Gram-farvning. Bakterier har cellevægge, der omgiver deres plasmamembran og giver dem fysisk beskyttelse. Gram-pletten skelner mellem gram-positive og gram-negative bakterier. Grampositive bakterier har tykkere cellevægge end gramnegative bakterier. Gramfarvning udføres, når det kemiske farvestof krystalviolet blandes med mordant jod. Jod og krystalviolet danner et stort kompleks, der udfældes ud af opløsningen. Under farvningsproceduren bades bakterierne i alkohol, hvilket får cellevæggene til at krympe. Denne svindning fælder jodkrystalvioletkomplekset i cellevæggen, hvilket giver grampositive bakterier en lilla farve. .
Jernhematoxylinfarvning
En anden almindelig plet i mikrobiologi er jernhematoxylin-pletten. Hematoxylin pletter DNA i mikroorganismernes kerner. Jernhæmatoxylin visualiserer parasitter i menneskers fækale stof. Jern er mordanten, der holder hæmatoxlin i at vaske væk under farvningsprocessen. Jernioner tilsættes til hæmatoxylin i form af jernholdigt ammoniumsulfat og jernholdigt ammoniumsulfat. Jernholdigt betyder, at jernatomet har ladning på +2, og jern betyder, at jernionen som en ladning på +3.
Syrefast plet
Syrefast farvning bruges til at detektere tilstedeværelsen af mycobakterier i sputum, som er en blanding af spyt og slim, der hostes op. Den kemiske farvestof fuschin pletter disse bakterier, men phenol - i form af carbolsyre - er det kemikalie, der holder fuschin i cellevæggen af mycobakterier. Fuschin opløses godt i phenol, men ikke vand eller alkohol. Til gengæld blandes phenol godt med den voksagtige cellevæg af mycobakterier. Således fungerer phenol som en taxa, der transporterer fuschin ind i cellevæggen. Phenol er ikke en metal- eller halogenidion, men fungerer som et mordant, fordi det holder farvestoffet på plads.