Při testování vlivu pH na aktivitu enzymu byste měli pH měnit. Můžete to však udělat dobrým nebo špatným způsobem. Mějte na paměti, jaké další faktory mohou zmást účinky různého pH. Jinak nemusí být získané výsledky způsobeny změnou pH, ale nějakým jiným faktorem. Pokud budete vědět, jak správně měnit pH a jaké faktory ovlivňují pH experimentu, pomůže vám to dosáhnout dobrých výsledků a pochopíte, proč nemusí být vaše výsledky přesně takové, jaké jste očekávali.
Změňte pouze jednu věc
Při testování vlivu pH na aktivitu enzymu měňte pouze pH, zatímco ostatní faktory zůstávají konstantní. Mezi tyto další faktory patří koncentrace enzymu, koncentrace substrátu a teplota. Faktory, které zůstávají konstantní, se nazývají řídicí proměnné. Kontrolní proměnné vám umožňují dospět k závěru, že výsledky aktivity enzymu získané ve vašem experimentu jsou způsobeny kolísáním pH, nezávislé proměnné. Vědět, jaké faktory se v experimentu nemění, je stejně důležité jako vědět, jaký faktor se má měnit, jinak bude těžké dospět k závěru, zda jsou výsledky skutečně způsobeny jedinou věcí, která byla testováno.
Vyberte jednu kyselinu nebo jednu základnu
PH roztoku lze změnit rozpuštěním různých množství kyseliny nebo zásady ve vodě. Jedním ze způsobů, jak otestovat vliv pH na aktivitu enzymu, je postupné přidávání kapek silné kyseliny nebo silné báze do roztoku, který obsahuje enzym, a poté pozorujte bod, ve kterém aktivita enzymu zpomalí nebo zastaví. Kyselina je definována jako sloučenina, která daruje vodíkový ion, nazývaná proton (H +), a báze je definována jako sloučenina, která daruje hydroxidový ion (-OH). Různé kyseliny a zásady mají různý počet protonů nebo hydroxidových iontů k rozdávání. Ne všechny protony nebo hydroxidové ionty se okamžitě přidají, když se do roztoku přidá kyselina nebo báze, ale počet darovaných protonů nebo hydroxidových iontů mění pH různými rychlostmi. Je tedy dobrý nápad měnit pH v experimentu s enzymy za použití pouze jednoho typu kyseliny nebo jednoho typu báze. Jinak jsou neúmyslně přidány další proměnné.
Tkáně také mění pH
Některé laboratorní experimenty, které studují aktivitu enzymů, zahrnují drcení čerstvé tkáně, aby se uvolnily enzymy z buněk, a pak přidání substrátu pro měření aktivity enzymu. Čerstvá tkáň obsahuje krev. Vzhledem k přítomnosti enzymů v krvi, které mění plynný oxid uhličitý, který se v krvi rozpouští na kyselinu uhličitou, může samotná tkáň ovlivnit pH. Takže v experimentech, které zahrnují aktivitu enzymů v čerstvé tkáni, je užitečné před mletím tkáně opláchnout krev v kádince se studenou vodou. Tím se minimalizuje nezamýšlená změna pH v důsledku tkáně, takže lze studovat účelnou změnu pH.
Udržujte velikosti stejné
Jak bylo diskutováno výše, koncentrace enzymu je kontrolní faktor, který by se neměl měnit při testování vlivu pH na aktivitu enzymu. Experimentální postupy však stále neodmyslitelně mění koncentraci enzymů. Pokud někdo používá čistý roztok enzymů, pak udržuje konstantní koncentraci enzymu. V experimentech, ve kterých je enzym z čerstvé tkáně, jako jsou kousky brambor, kousky rostlin nebo kousky jater, však velikost kousků mění množství enzymu v každé zkumavce. Bude tedy užitečné řezat kousky tkáně co nejrovnoměrněji. Toto je další příklad toho, jak vědět, co se neměnit a proč je těžké nevyhnout se změně úplně, pomáhá interpretovat výsledky různých faktorů, jako je pH.