Jaké jsou výhody HPLC oproti GC?

Chromatografické techniky se provádějí ve vědeckých laboratořích k oddělení chemických sloučenin od neznámého vzorku. Vzorek se rozpustí v rozpouštědle a protéká kolonou, ve které se oddělí přitahováním sloučeniny k materiálu kolony. Tato polární a nepolární přitažlivost k materiálu kolony je aktivní silou, která způsobuje, že se sloučeniny v průběhu času oddělují. Dva typy chromatografie, které se dnes používají, jsou plynová chromatografie (GC) a vysoce účinná kapalinová chromatografie (HPLC).

Plynová chromatografie odpařuje vzorek a ten je veden systémem inertním plynem, jako je helium. Použití vodíku vede k lepší separaci a účinnosti, ale mnoho laboratoří zakazuje použití tohoto plynu kvůli jeho hořlavé povaze. Při použití kapalinové chromatografie zůstává vzorek v kapalném stavu a je protlačován kolonou za vysokého tlaku pomocí různých rozpouštědel, jako je voda, methanol nebo acetonitril. Různé koncentrace každého rozpouštědla ovlivní chromatografii každé sloučeniny odlišně. Ponechání vzorku v kapalném stavu zvyšuje stabilitu sloučeniny.

instagram story viewer

Kolony pro plynovou chromatografii mají velmi malý vnitřní průměr a jejich délka se může pohybovat od 10 do 45 metrů. Tyto kolony na bázi oxidu křemičitého jsou stočeny podél kruhového kovového rámu a zahřívány na teplotu 250 stupňů Fahrenheita. Kolony pro kapalinovou chromatografii jsou také na bázi oxidu křemičitého, ale mají tlusté kovové pouzdro, které vydrží vysoké množství vnitřního tlaku. Tyto kolony pracují při pokojové teplotě a jejich délka se pohybuje od 50 do 250 centimetrů.

Při plynové chromatografii se vzorek vstřikovaný do systému odpaří při teplotě přibližně 400 stupňů Fahrenheita, než se provede kolonou. Sloučenina tedy musí být schopna odolat teplu při vysokých teplotách, aniž by se rozpadla nebo degradovala na jinou molekulu. Kapalinové chromatografické systémy umožňují vědci analyzovat větší a méně stabilní sloučeniny, protože vzorek není vystaven teplu.

Teachs.ru
  • Podíl
instagram viewer