Пет стъпки за приготвяне на наклонени агари

Агарът е желеобразно вещество, получено от пречистените клетъчни стени на червените водорасли. Той се добавя към микробиологични среди, които са материали, върху които микроорганизмите се отглеждат в лаборатории, за да се осигури повече твърда структура на веществото. Агарът няма хранителна стойност, така че когато учените го използват за култивиране на микроорганизми, те добавят различни хранителни вещества, за да увеличат растежа на бактериите в чашките на Петри или епруветките. Когато изследователите съхраняват бактерии в епруветка, това се нарича агарен наклон, тъй като течната среда за растеж се втвърдява, докато епруветката е в наклонено положение. Върхът с капачка на винт върху наклона предотвратява изсъхването на агара.

Средата е приготвена по различен начин за наклонени наклонения, отколкото петри. Стерилизацията се извършва с агар в епруветките; чашките на Петри се стерилизират предварително, преди в тях да се излее стерилизиран агар. Измерете необходимото количество вода и го поставете в колба на Ерленмайер. Загрейте го на котлон, докато почти заври. Добавете други съставки, ако е необходимо и разбъркайте сместа бавно и постоянно, докато се разтворят. Тези съставки могат да включват екстракт от говеждо месо, пептон и pH буфери, в зависимост от вида на култивирания микроорганизъм.

Преди да добавите дехидратирания агар на прах, смесете го с малко количество студена дестилирана вода, за да предотвратите образуването на бучки. Внимавайте, когато добавяте агар към горещата течност, тъй като тя може да се разпенва и да прелива тенджерата. Добавяйте малки количества агар наведнъж и разбърквайте, за да разпределите равномерно агара. Изключете котлона, когато сместа започне да се пара, преди да заври.

Поставете незатворените епруветки върху решетката за епруветки. Напълнете епруветките, като прехвърлите около 5 милилитра - около 0,17 унция или 1 чаена лъжичка - от разтопения агар от съда с помощта на стерилна пипета. Свободно запушете всяка от епруветките, защото агарът няма да бъде стерилизиран, ако са плътно затворени. Стерилизирайте всички тръби в автоклав за около 25 минути при 121 градуса по Целзий или 250 градуса по Фаренхайт.

Когато агарът е все още горещ, внимателно наклонете решетката, държеща епруветките върху твърда повърхност или a дебела книга, като се уверите, че средата вътре в тръбите е в наклонено положение спрямо теста тръби. Оставете средата да се охлади и втвърди под този ъгъл, което увеличава повърхността на агара. Затегнете капачките на епруветките, след като агарът се охлади. Наклоните са готови за употреба, след като агарът се втвърди. Те могат да се съхраняват при стайна температура или в хладилник за бъдеща употреба.

Инокулирайте наклона, като прехвърлите клетки с инокулационен контур от едноколонен микроорганизъм върху плоча към повърхността на наклона. Преместете цикъла по повърхността на наклона и затворете отново тръбите. Инкубирайте наклона, докато има доказателства за растеж, след това поставете епруветката в хладилник.

  • Дял
instagram viewer