Микробиолог използва хитиново оцветяване, за да може ясно да види гъбички под микроскопа. Гъбите използват хитин като структурен материал в клетъчните си стени, така че петното добре показва клетъчната стена. Лактофеноловото памучно синьо петно е най-често срещаното петно за гъбички. Фенолът убива микроорганизмите и предотвратява разграждането на клетките от гъбични ензими. Памучно синьото багрило превръща хитина в синьо. Оцветяването с хитин е относително ясна процедура с евтини материали. Можете или да направите собствено багрило, или да купите комерсиално приготвено петно.
Пригответе разтвор на лактофенол памучно синьо. Претеглете 0,05 грама памучно синьо багрило с помощта на чувствителна везна за претегляне. Смесете боята с 20 милилитра дестилирана вода в епруветка и я оставете за една нощ.
Сложете ръкавици, преди да приключите с подготовката на петна на следващия ден. Поставете 20 ml млечна киселина в бехерова чаша и я смесете с 20 g фенолни кристали. Разбъркайте, докато сместа се разтвори. Добавете 40 ml глицерол и разбъркайте. След това прецедете памучно синия разтвор през парче филтърна хартия в чашата и разбъркайте добре.
Като алтернатива, използвайте комерсиално приготвен източник на петно. Съхранявайте петното при стайна температура.
Етикетирайте микроскоп с предметно наименование или номер на пробата. Използвайте една стерилна капкомер, за да поставите една капка водна проба в центъра на предметното стъкло на микроскопа. За суха проба поставете една капка 70% алкохолен разтвор върху предметното стъкло и след това използвайте стерилен контур, за да смесите сухата проба с алкохола.
Използвайте чиста капкомер, за да прехвърлите две капки от лактофенолово памучно синьо петно върху центъра на пързалката. Ако използвате 70 процента алкохол върху пързалката, направете това, преди алкохолът да се изпари от пързалката.
Докоснете единия край на капака на микроскопа до единия край на мократа подготовка на пробата. Оставете фиша да попадне внимателно върху подготовката на пробата, като се уверите, че няма да задържате въздушни мехурчета под пързалката. Оцветената проба вече е готова за изследване под микроскоп.