Буферните разтвори се противопоставят на промените в рН, тъй като съдържат слаби киселинно-алкални конюгати, които неутрализират Н + и ОН- йони. Буферните разтвори се състоят от слаби киселини или основи и солта на тази киселина или основа. Изборът на подходяща буферна система зависи от обхвата на рН за буфериране. Повечето биологични реакции протичат при рН от 6 до 8. Фосфатните буфери буферират в диапазона на рН от 6,5 до 7,5. Буферите на карбоксилната киселина са полезни от рН 3 до 6. Боратните буфери функционират от рН 8,5 до 10. Аминокиселинните буфери като глицин и хистидин действат в различни диапазони на рН. Tris буферът е една от най-често използваните буферни системи в лабораториите по биология. В следващия пример ще бъдат използвани изчисления за буферен разтвор на Tris, но методологията се прилага за всеки буферен разтвор.
Използвайте произведението на крайността на моларността и обема на крайния разтвор, за да определите необходимите молове на основата. Например, ако са необходими 2 литра 0,1 M разтвор на Tris буфер, броят на необходимите бенки Tris е:
Изчислете масата на необходимия буфер, като умножите броя на необходимите бенки по молекулното тегло на основата. Например, масата от 0,2 мола основа на Трис е равна на:
Разтворете основата в дестилирана вода с помощта на магнитна бъркалка и бъркалка. Разтворете го в обем вода, малко по-малък от крайния обем на разтвора (950 до 975 mL за всеки литър краен разтвор). РН на Tris буфера се променя с концентрация и се нуждае от пренастройка, ако се използва твърде малък първоначален обем. Също така е най-добре буферът да се приготви при същата температура, която ще се използва по време на анализа или експеримента, тъй като Tris има големи температурно зависими промени в рН.
Съвети
- За да спестите време при приготвянето на буферен разтвор, можете да използвате готови буферни концентрати при необходимото рН и разредени за желаната моларност и обем. Пригответе буферен разтвор при същата температура, с която ще се използва, за да се избегнат значителни промени в рН. Избягвайте отнемащите време корекции на pH, титрувайте само след разреждане до желаната концентрация. Разтварянето в твърде малък обем ще доведе до многократно титруване.
Предупреждения
- Бъдете внимателни при работа с киселини и основи. Носете защитни очила.
за автора
Карла Булиан е еволюционен биолог по образование и писател на свободна практика по страст. В допълнение към писането за Demand Studios и eHow, тя е автор на играта за Parenting a Gifted Child в Suite101.com. Тя се вълнува от изследването на нови теми чрез обширни изследвания.
Снимки Кредити
Снимката е предоставена от Emmi P. @ morgueFile.com