السبب الرئيسي الذي يجعلك تلطخ عينة قبل وضعها تحت المجهر هو إلقاء نظرة أفضل عليها ، لكن التلوين يفعل أكثر بكثير من مجرد إبراز الخطوط العريضة للخلايا. يمكن لبعض البقع أن تخترق جدران الخلايا وتسليط الضوء على مكونات الخلية ، وهذا يمكن أن يساعد العلماء على تصور عمليات التمثيل الغذائي. تساعد البقع أيضًا في التمييز بين الخلايا الحية والميتة. علاوة على ذلك ، يسمح التلوين للعلماء بحساب عدد الخلايا من نوع معين داخل كتلة حيوية معينة. يوجد عشرين نوعًا مختلفًا أو أكثر من البقع ، ولكل نوع غرضه الخاص.
TL ؛ DR (طويل جدًا ؛ لم أقرأ)
الغرض الرئيسي من التلوين هو إبراز الخلايا وأجزاء الخلايا. يوجد أكثر من 20 نوعًا مختلفًا من البقع ، ويعتمد نوع البقعة الذي تستخدمه على ما تبحث عنه.
أنواع البقع
يعتمد اختيار البقعة على ما تبحث عنه. ليست كل البقع مناسبة للخلايا الحية ، ولكن تلك التي تشمل بسمارك البني ، والتولوين الأحمر ، وأزرق النيل ، وأحمر النيل ، وبعض الفلورسينت المستخدمة لإبراز الحمض النووي. تبرز بعض البقع الجراثيم ، وبعضها يكتشف الدهون والبروتينات ، وبعضها يتغير لونه في وجود النشويات. يحدد الغرض من الفحص أفضل نوع من البقع يمكن استخدامه. على سبيل المثال ، قد يستخدم الممارس الطبي الذي يجري مسحة PAP Eosin Y. إنها صبغة فلورية حمضية تتحول إلى اللون الأحمر عندما تلامس خلايا الدم الحمراء والسيتوبلازم وأغشية الخلايا. كما أنها تستخدم لاختبار نخاع الدم.
في بعض الحالات ، قد يستخدم المحقق أكثر من بقعة واحدة. على سبيل المثال ، الهيماتوكسيلين هو بقعة تحول نواة الخلية إلى اللون الأزرق. عند استخدامه بالاقتران مع eosin ، الذي يحول الأجزاء الأخرى من الخلية إلى اللون الأحمر أو الوردي ، فإنه يوفر تباينًا أقوى ويجعل تمييز النوى أسهل. يسهل فحص مسحات PAP وعينات نخاع الدم عند استخدام هاتين البقعين معًا.
بقعة غرام: يستخدم عمال المستشفى بقعة غرام لتحديد البكتيريا الضارة. هذه في الواقع سلسلة من الملونات لها تأثيرات مختلفة على أنواع مختلفة من البكتيريا وتمنح الأطباء أداة تشخيصية مهمة. وصمة غرام هي عملية من ثلاثة أجزاء. في الأول ، تمت إضافة اللون البنفسجي البلوري من Hucker ، والذي يصبغ جميع البكتيريا بلون بنفسجي موحد. في المرحلة التالية ، تتم إضافة صبغة اليود ، مما يؤدي إلى التصاق اللون بالخلايا موجبة الجرام ، والتي تتكون أساسًا من المكورات العنقودية والمكورات العقدية. يتم غسل البقعة ، تاركًا الخلايا موجبة الجرام بلون بنفسجي مميز ؛ ثم يتم إدخال صبغة ثالثة ، Safranine O ، لتعزيز التباين بين البكتيريا سالبة الجرام وبقية المواد في الشريحة.
إجراء تلطيخ
عند تحضير عينة على شريحة ، يمكنك تركيبها جافة أو مبللة ، ويمكنك تقطيعها إلى قسم رفيع أو يمكنك تشويهها. عند استخدام البقعة ، فإن الإجراء المعتاد هو تركيب العينة الرطبة ، مما يعني وضع قطرة ماء على الشريحة ، وتعيين العينة في الماء وتغطيتها بغطاء. يمكنك بعد ذلك وضع البقعة على زاوية من الشريحة باستخدام قطارة والسماح لها برسمها نحو العينة عن طريق عمل الشعيرات الدموية. يساعد وضع منشفة ورقية على الجانب الآخر من الشريحة لجذب الماء. بمجرد انتشار البقعة على الشريحة بأكملها ، تكون العينة جاهزة للفحص.
