تقنيات العزل للوحة الخط

على الرغم من أنه لا يمكن رؤيتها بالعين المجردة ، إلا أن البكتيريا موجودة في كل مكان. توجد في الطعام والتربة والماء والأسطح داخل منازلنا وفي أجسادنا. توجد البكتيريا بشكل عام في مجموعات سكانية مختلطة. يسمح عزل بكتيريا معينة عن الأنواع البكتيرية الأخرى في عينة معينة لعلماء الأحياء المجهرية بدراسة هيكلها ووظيفتها ، والخصائص المستخدمة في تحديدها. كثيرًا ما يعزل علماء الأحياء المجهرية البكتيريا باستخدام إحدى تقنيات لوحة الخطوط العديدة.

يتم استخدام حلقة التلقيح لنقل الكائنات الحية الدقيقة. يتكون من سلك نيتشروم أو بلاتينيوم بحلقة دائرية صغيرة في أحد طرفيه. الطرف الآخر مستقيم وينزلق في مقبض. حلقات التلقيح البلاستيكية التي يمكن التخلص منها متوفرة أيضًا. لا يمكن عزل البكتيريا إلا إذا نمت. يقوم علماء الأحياء الدقيقة بزراعة البكتيريا لعزل الصفائح في أطباق بتري ضحلة ومستديرة مليئة بوسط صلب يسمى أجار. أجار يحاكي البيئة التي تنمو فيها البكتيريا بشكل طبيعي. الأطباق المليئة بالوسائط معقمة ومغطاة لمنع نمو الكائنات الحية غير المرغوب فيها. أثناء عزل لوحة الخط ، يتم تعقيم حلقة التلقيح بشكل متكرر في لهب موقد بنسن.

تقنية لوحة الخطوط هي الطريقة الأكثر شيوعًا لعزل بكتيريا معينة من عينة تحتوي على خليط من الكائنات الحية الدقيقة. تقلل هذه التقنية بشكل أساسي من عدد الكائنات الحية وتقلل من كثافتها. يسمح لعلماء الأحياء الدقيقة بتمييز وعزل المستعمرات البكتيرية الفردية. المستعمرة هي مجموعة مرئية من البكتيريا. جميع البكتيريا في مستعمرة واحدة تنشأ من نفس الخلية البكتيرية. وبالتالي ، فإن المستعمرات الفردية هي مستعمرات "نقية". يتم نقل المستعمرة النقية إلى طبق آخر لإنتاج ثقافة نقية تتكون من نوع واحد من البكتيريا.

عند القيام بذلك بشكل صحيح ، فإن عزل لوحة الخط يخفف من العينة ويمكّن الخلايا البكتيرية الفردية من التطور إلى مستعمرات معزولة. يبدأ عالم الأحياء الدقيقة بتعقيم حلقة التلقيح في اللهب. تقوم بتبريد الحلقة عن طريق ملامستها للأجار ، ثم تغمس الحلقة في العينة وتنشرها ذهابًا وإيابًا لتغطية جزء من اللوحة. تقوم بتعقيم الحلقة ، وتبريدها ، وتلقيح قسم ثانٍ مجاور من اللوحة عن طريق السحب الحلقة من خلال القسم الأول عدة مرات وتغطي القسم الثاني باستخدام متعرج اقتراح. هذا يلتقط عددًا صغيرًا من البكتيريا من القسم الأول وينقلها إلى القسم الثاني. يعتمد عدد مرات تكرار هذا الإجراء الأساسي على طريقة لوحة الخط المستخدمة. على الرغم من الطريقة ، يتم استخدام العينة الأصلية لتلقيح القسم الأول من اللوحة فقط.

تختلف طرق لوحة الخطوط حسب عدد أقسام أجار المخططة. تستخدم طريقة T-streak ثلاثة أقسام: النصف العلوي وقسمان سفليان متساويان الحجم. يتم وضع اللقاح الأولي في النصف العلوي من اللوحة. يتم سحب البكتيريا من القسم العلوي إلى أحد الأقسام السفلية ، ثم من ذلك القسم السفلي إلى القسم الآخر. في الطريقة الرباعية ، أربعة أقسام متساوية الحجم مخططة. تتضمن طريقة التخطيط المستمر عادةً تلقيح النصف العلوي من اللوحة ، وتدويرها 180 درجة ، وتلقيح النصف الآخر من اللوحة دون تعقيم الحلقة أو جر البكتيريا من السابق القطاع الثامن.