اختبار اللطخة الغربية ، المعروف أيضًا باسم التجلط المناعي ، هو اختبار لبروتين معين داخل خليط البروتين. يتم إجراء اختبار اللطخة الغربية بعد الرحلان الكهربي للهلام أو اختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) ، ويستخدم الأجسام المضادة لتحديد بروتينات معينة.
الرحلان الكهربائي لهلام دوديسيل كبريتات الصوديوم بولي أكريلاميد (SDS-PAGE) هو اختبار شائع يستخدم لفصل البروتينات لاستخدامها في لطخة ويسترن. يتم فصل البروتينات بالوزن والخصائص الكهربائية أثناء تحركها عبر مصفوفة هلامية.
يستخدم اختبار ELISA إنزيمات أو أجسامًا مضادة متصلة بسطح صلب لإنشاء سطح الاختبار. ثم تضاف عينة إلى سطح الاختبار. تشير الأجسام المضادة أو الإنزيمات التي تتفاعل أو ترتبط بالبروتينات إلى نتيجة إيجابية.
يتم إجراء اختبار اللطخة الغربية بعد الرحلان الكهربائي للهلام. يتم نقل البروتينات المفصولة (أو تنشيفها) إلى أغشية النيتروسليلوز أو النايلون ويتم التعرف عليها بواسطة أجسام مضادة محددة يتم تمييزها بواسطة بروتين ثانوي.
يستخدم اختبار اللطخة الغربية لتأكيد النتائج الإيجابية من اختبارات الرحلان الكهربي للهلام أو ELISA. يمكن أن يحدد اختبار اللطخة الغربية البروتينات بشكل أكثر تحديدًا ويمكن أن يستبعد الإيجابيات الخاطئة.