مصادر الخطأ في الرحلان الكهربائي للهلام

يعتبر الفصل الكهربائي للهلام أحد الطرق الرئيسية المستخدمة في البيولوجيا الجزيئية لتحليل الحمض النووي. تتضمن هذه الطريقة هجرة أجزاء من الحمض النووي عبر مادة هلامية ، حيث يتم فصلها على أساس الحجم أو الشكل. ومع ذلك ، فحتى الطريقة السليمة علميًا مثل الرحلان الكهربي للهلام ليست محصنة ضد الأخطاء.

•••Jezperklauzen / إستوك / جيتي إيماجيس

يتضمن الرحلان الكهربائي للهلام استخدام مادة هلامية عادة ما تكون مصنوعة من بوليمرات مثل الاغاروز. يتم غمر الجل في محلول عازل يوصل مجالًا كهربائيًا. يتم أولاً تجزئة عينة الحمض النووي محل الاهتمام باستخدام إنزيمات تقييدية ثم يتم حقنها في الهلام. عندما يتم تشغيل المجال الكهربائي ، تهاجر شظايا الحمض النووي في الهلام نحو القطب الموجب. إذا كانت أجزاء الحمض النووي ذات أحجام مختلفة ، فستكون أوقات الترحيل مختلفة لكل جزء من الحجم. يتم بعد ذلك تصور الأجزاء باستخدام صبغة أو تصوير إشعاعي ذاتي وتكون مرئية كأشرطة في الهلام.

•••aiaikawa / إستوك / جيتي إيماجيس

التطبيق الرئيسي للرحلان الكهربائي هو كأداة لتحليل الحمض النووي في البيولوجيا الجزيئية ، ولكنه يستخدم أيضًا في الطب الشرعي كوسيلة لتحديد العينات من مسرح الجريمة. من المهم تقليل مصادر الأخطاء في هذه التقنية من أجل الحصول على نتائج دقيقة. أحد مصادر الخطأ هو تلوث عينة الحمض النووي. إذا كان هناك دنا أجنبي في العينة ، فسيكون للهلام نطاقات أكثر من تلك الموجودة في الهلام الذي يحتوي فقط على العينة النقية.

•••IndiaImages / iStock / Getty Images

يجب أيضًا أن يكون تركيز الهلام صحيحًا لتجنب الأخطاء. إذا كان التركيز مرتفعًا جدًا أو منخفضًا جدًا ، فسوف تنتقل الأجزاء إما ببطء شديد أو بسرعة كبيرة. سيؤدي هذا إلى أخطاء في حل النطاقات المختلفة. أثناء تشغيل الرحلان الكهربي ، يجب توخي الحذر لضمان ثبات الجهد. ستؤدي أي تقلبات في الجهد إلى هجرة غير ثابتة لشظايا الحمض النووي ، مما يؤدي إلى أخطاء في قراءة النطاقات. يجب أيضًا أن يكون المحلول العازل من التركيبة الصحيحة ، حيث أن المخزن المؤقت ذو الرقم الهيدروجيني الخاطئ أو التركيز الأيوني سيغير شكل أجزاء الحمض النووي ، ويغير أيضًا أوقات هجرتها.

•••إنجرام للنشر / إنجرام للنشر / جيتي إيماجيس

الأهم من ذلك ، يجب تصور الجل بشكل صحيح. إذا كان تركيز الصبغة أو المسبار المشع المستخدم لتصور العينات مرتفعًا جدًا ، فستكون الصورة الناتجة فوضوية للغاية ، حيث سيتم أيضًا تصور الأجزاء المتبقية. إذا كان تركيز الهلام منخفضًا جدًا ، فلن يكون هناك تصور. عندما يتم اتباع العمليات الصحيحة خلال جميع المراحل ، سوف ينتج عن الرحلان الكهربائي للهلام نتائج دقيقة ويمكن استخدامها بثقة كبيرة. كما هو الحال مع جميع الإجراءات العلمية ، يمكن أن يكون التفريد الكهربائي للهلام عرضة للأخطاء ، ولكن يمكن التقليل من ذلك من خلال الإعداد والتعامل المناسبين.