ما الذي يتنوع عند اختبار تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم؟

عندما تختبر تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم ، يجب أن تغير الأس الهيدروجيني. ومع ذلك ، يمكنك القيام بذلك بطرق جيدة أو سيئة. ضع في اعتبارك العوامل الإضافية التي قد تخلط آثار تغير درجة الحموضة. خلاف ذلك ، قد لا تكون النتائج التي تم الحصول عليها بسبب التغيير في الرقم الهيدروجيني ، ولكن بعض العوامل الأخرى. إن معرفة كيفية تغيير الأس الهيدروجيني بشكل صحيح والعوامل التي تربك الرقم الهيدروجيني للتجربة سيساعدك في الحصول على نتائج جيدة وفهم سبب عدم تحقق نتائجك تمامًا كما توقعت.

عند اختبار تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم ، قم بتغيير الأس الهيدروجيني فقط مع إبقاء العوامل الأخرى ثابتة. تشمل هذه العوامل الأخرى تركيز الإنزيم وتركيز الركيزة ودرجة الحرارة. تسمى العوامل التي تظل ثابتة بمتغيرات التحكم. تسمح لك متغيرات التحكم باستنتاج أن النتائج على نشاط الإنزيم التي تم الحصول عليها في تجربتك ترجع إلى اختلاف درجة الحموضة ، المتغير المستقل. إن معرفة العوامل التي لا يجب تغييرها في التجربة لا تقل أهمية عن معرفة العامل الذي يجب تغييره ، وإلا فسيكون من الصعب استنتاج ما إذا كانت النتائج ترجع بالفعل إلى الشيء الوحيد الذي كان تم اختباره.

يمكن تغيير الرقم الهيدروجيني للمحلول عن طريق إذابة كميات مختلفة من حمض أو قاعدة في الماء. تتمثل إحدى طرق اختبار تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم في إضافة قطرات من حمض قوي أو قاعدة قوية تدريجيًا في المحلول الذي يحتوي على الإنزيم ، ثم لاحظ النقطة التي يتباطأ فيها نشاط الإنزيم أو توقف. يتم تعريف الحمض على أنه مركب يتبرع بأيون الهيدروجين ، يسمى البروتون (H +) ، ويتم تعريف القاعدة على أنها مركب يتبرع بأيون الهيدروكسيد (-OH). تحتوي الأحماض والقواعد المختلفة على أعداد مختلفة من البروتونات أو أيونات الهيدروكسيد التي يجب التخلي عنها. لا يتم التبرع بجميع البروتونات أو أيونات الهيدروكسيد فورًا عند إضافة حمض أو قاعدة إلى المحلول ، ولكن عدد البروتونات المتبرع بها أو أيونات الهيدروكسيد يغير الرقم الهيدروجيني بمعدلات مختلفة. وبالتالي ، من الجيد تغيير الأس الهيدروجيني في تجربة الإنزيم باستخدام نوع واحد فقط من الحمض أو نوع واحد من القواعد. خلاف ذلك ، يتم إضافة متغيرات أخرى عن غير قصد.

تتضمن بعض التجارب المعملية التي تدرس نشاط الإنزيم طحن الأنسجة الطازجة لتحرير الإنزيمات من الخلايا ثم إضافة ركيزة لقياس نشاط الإنزيم. تحتوي الأنسجة الطازجة على الدم. بسبب وجود الإنزيمات في الدم التي تغير غاز ثاني أكسيد الكربون المذاب في الدم إلى حمض الكربونيك ، فإن الأنسجة نفسها قد تؤثر على الرقم الهيدروجيني. وبالتالي ، في التجارب التي تنطوي على نشاط إنزيم في الأنسجة الطازجة ، من المفيد غسل الدم في كوب من الماء البارد قبل طحن الأنسجة. سيؤدي هذا إلى تقليل التغيير غير المقصود في درجة الحموضة بسبب الأنسجة ، بحيث يمكن دراسة التغيير الهادف في درجة الحموضة.

كما نوقش أعلاه ، فإن تركيز الإنزيم هو عامل تحكم لا ينبغي تغييره عند اختبار تأثير الأس الهيدروجيني على نشاط الإنزيم. ومع ذلك ، لا تزال الإجراءات التجريبية تختلف بطبيعتها في تركيز الإنزيم بطرق خفية. إذا كان المرء يستخدم محلولًا نقيًا من الإنزيمات ، فيجب الحفاظ على تركيز الإنزيم ثابتًا. ومع ذلك ، في التجارب التي يكون فيها الإنزيم من الأنسجة الطازجة ، مثل قطع البطاطس أو قطع النباتات أو قطع الكبد ، يغير حجم القطع كمية الإنزيم في كل أنبوب اختبار. وبالتالي ، سيكون من المفيد قطع قطع الأنسجة بشكل موحد قدر الإمكان. هذا مثال آخر على كيفية معرفة ما لا يجب تغييره ، ولماذا من الصعب عدم تجنب التغيير تمامًا ، يساعد في تفسير نتائج تغيير عامل مثل الرقم الهيدروجيني.