Основна причина, по якій ви фарбуєте зразок перед тим, як покласти його під мікроскоп, полягає в тому, щоб краще його розглянути, але фарбування набагато більше, ніж просто виділення контурів клітин. Деякі плями можуть проникати крізь клітинні стінки і виділяти клітинні компоненти, і це може допомогти вченим візуалізувати обмінні процеси. Плями також допомагають розрізнити живі клітини від мертвих. Більше того, фарбування дозволяє вченим підрахувати кількість клітин певного типу в межах певної біомаси. Існує двадцять і більше різних видів плям, і кожна з них має своє призначення.
TL; ДР (занадто довгий; Не читав)
Основна мета фарбування - виділити клітини та частини клітин. Існує понад 20 різних типів плям, і тип плям, які ви використовуєте, залежить від того, що ви шукаєте.
Види плям
Вибір плями залежить від того, що ви шукаєте. Не всі плями підходять для живих клітин, але до них належать коричневий бісмарк, червоний толуол, блакитний Ніл та червоний Ніл та деякі флуоресцентні лампи, що використовуються для виділення ДНК. Деякі плями виділяють спори, деякі виявляють ліпіди та білки, а деякі змінюють колір у присутності крохмалів. Мета обстеження визначає найкращий тип плям для використання. Наприклад, лікар, який проводить мазок PAP, використовував би Eosin Y. Це кислий флуоресцентний барвник, який червоніє, коли контактує з еритроцитами, цитоплазмою та клітинними мембранами. Він також використовується для тестування мозку крові.
У деяких випадках слідчий може використовувати більше одного плями. Наприклад, гематоксилін - це пляма, яка стає синім ядер клітин. При використанні разом з еозином, який перетворює інші частини клітини в червоний або рожевий, він забезпечує сильніший контраст і полегшує диференціювання ядер. Мазки PAP та зразки кров’яного мозку легше дослідити, коли ці два плями використовуються разом.
Пляма Грама: Працівники лікарні використовують пляму Грама для виявлення шкідливих бактерій. Це насправді серія барвників, які по-різному впливають на різні типи бактерій і дають лікарям важливий діагностичний інструмент. Пляма по Граму - це процес із трьох частин. У першу додано кришталеву фіалку Геккера, яка забарвлює всі бактерії в однорідний фіолетовий колір. На наступному етапі додається йодна пляма, що змушує колір прилипати до грампозитивних клітин, які є насамперед стафілококами та стрептококами. Пляма змивається, залишаючи грампозитивні клітини з чітко вираженим фіолетовим кольором; потім вводиться третя пляма, Сафранін О, для посилення контрасту між грамнегативними бактеріями та рештою матеріалу на предметному склі.
Процедура фарбування
Готуючи зразок на предметному склі, ви можете змонтувати його насухо або мокрим способом, нарізати на тонкий зріз або розмазати. Застосовуючи пляму, звичайною процедурою є монтування зразка, що означає покласти краплю води на предметне скло, встановити зразок у воду і накрити покривним накладкою. Потім ви наносите пляму крапельницею на кут предметного стекла і дозволяєте капілярною дією підтягувати її до зразка. Допомагає покласти паперовий рушник на протилежну сторону гірки, щоб залучити воду. Після того, як пляма поширилася на всю гірку, зразок готовий до дослідження.