Агар - желеподібна речовина, що отримується з очищених клітинних стінок червоних водоростей. Його додають до мікробіологічних середовищ, які є матеріалами, на яких мікроорганізми вирощуються в лабораторіях, щоб забезпечити речовині більшу тверду структуру. Агар не має харчової цінності, тому, коли вчені використовують його для культивування мікроорганізмів, вони додають різні поживні речовини для збільшення росту бактерій в чашках Петрі або пробірках. Коли дослідники зберігають бактерії в пробірці, це називають агаровим нахилом, оскільки рідкі середовища для зростання твердіють, поки пробірка знаходиться в нахиленому положенні. Верхня кришка на гвинті на косі запобігає висиханню агару.
Середовище готується інакше для нахилів, ніж чашки Петрі. Стерилізація проводиться за допомогою агару в пробірках; чашки Петрі попередньо стерилізують перед тим, як в них залити стерилізований агар. Виміряйте необхідну кількість води і покладіть її в колбу Ерленмейера. Нагрівайте його на плиті, поки він майже не закипить. За потреби додайте інші інгредієнти і повільно і постійно перемішуйте суміш, поки вони не розчиняться. Ці інгредієнти можуть включати екстракт яловичини, пептон та буфери рН, залежно від типу мікроорганізму, що культивується.
Перед додаванням зневодненого порошку агару змішайте його з невеликою кількістю холодної дистильованої води, щоб запобігти появі грудочок. Будьте обережні, додаючи агар до гарячої рідини, оскільки він може пінитися і переливати горщик. Додайте невелику кількість агару за раз і перемішуйте, щоб рівномірно розподілити агар. Вимкніть вогонь, коли суміш почне паритися, до того, як вона закипить.
Покладіть незакриті пробірки на стійку для пробірок. Наповніть пробірки, перенісши з стерильної піпетки близько 5 мілілітрів - приблизно 0,17 унції або 1 чайну ложку - розплавленого агару з горщика. Слабко закрийте кожну пробірку, оскільки агар не буде стерилізований, якщо вони щільно герметично закриті. Стерилізуйте всі пробірки в автоклаві приблизно 25 хвилин при 121 градусі Цельсія або 250 градусах Фаренгейта.
Коли агар ще гарячий, обережно нахиліть стійку, утримуючи пробірки, на твердій поверхні або a товста книга, переконуючись, що середовище всередині пробірок знаходиться в похилому положенні щодо тесту трубки. Дайте середовищу охолонути і застигнути під цим кутом, що збільшує площу поверхні агару. Після охолодження агару затягніть кришки пробірок. Нахили готові до використання після затвердіння агару. Їх можна зберігати при кімнатній температурі або в холодильнику для подальшого використання.
Інокулюйте нахил, переносячи клітини за допомогою прищеплюючої петлі з одноколонійного мікроорганізму на пластину на поверхню нахилу. Перемістіть петлю по поверхні нахилу і закрутіть трубки. Інкубуйте нахил до появи ознак зростання, а потім поставте пробірку в холодильник.