Як визначити Enterobacter Aerogenes API 20E

Enterobacter aerogenes та інші види Enterobacteriaceae легко ідентифікувати за допомогою тестового набору API-20E. Цей комплект, виготовлений компанією bioMeriuex Inc., включає 20 міні-пробірок або лунок для тесту. Випробування полягає у посіві чистої бактеріальної суспензії в дослідні лунки та зчитуванні кольорових реакцій, що виникають. Ідентифікація залежить від перетворення результатів цих кольорових реакцій у семизначний код, відомий як індекс аналітичного профілю. Поєднання цього коду з базою даних виробника забезпечує ідентифікацію організму.

Відкрийте ампулу, що містить 5 мл натрію хлориду на 0,85 відсотка середовища. Видаліть одну колонію з ізоляційної пластини віком від 18 до 24 годин за допомогою піпетки та додайте її в ампулу. Перемішайте до отримання однорідної суспензії. Використовуйте цю суспензію, як тільки закінчите її приготування.

Встановіть інкубаційну коробку, яка складається із сотових лунок у піддоні з кришкою. Відкрийте коробку та додайте 5 мл демінералізованої або дистильованої води в лунки. Розпакуйте смужку, що міститься в наборі для тестування API 20E, і покладіть у інкубаційну коробку.

Наповніть приготовлену суспензією пробірку та капсулу лунок із позначками «GEL», «VP» та «CIT». В інші лунки залийте бактеріальну суспензію в пробірку, але не в капулу. Додайте мінеральну олію в свердловини з маркуванням "ADH", "ODC", "LDC", "URE" і "H2S", щоб створити анаеробне середовище.

Накрийте інкубаційну коробку кришкою та інкубуйте при температурі від 34 до 38 градусів Цельсія від 18 до 24 годин.

Поспостерігайте за лунками та відзначте реакції на аркуші результатів. За умови, що принаймні три тести є позитивними, перейдіть до кольорових реакцій, використовуючи хімічні розчини для тестування або реагенти, що входять до комплекту. Додайте одну краплю реагенту TDA в добре позначену "TDA" і краплю кожного реагенту VP1 і VP2 у добре позначені "ВП". Якщо менше трьох тестів виявилися позитивними, інкубуйте смужки ще 24 години, перш ніж додавати їх реагенти.

Спостерігайте за змінами кольору, що утворюються в лунках. Червоно-коричневий колір при TDA свідчить про позитивну реакцію. Зачекайте 10 хвилин після додавання реагентів із набору у VP1 та VP2. Червоний або рожевий колір вважайте позитивним, а блідо-рожевий - через 10 хвилин - негативним.

Виконайте тест на оксидазу, як визначено виробником набору, і запишіть його результати разом із результатами попередніх 20 тестів.

Внесіть цей семизначний номер профілю в базу даних виробника комплекту через телефон із сенсорним сигналом. Зачекайте, щоб отримати ідентифікаційний номер, наданий базою даних. Якщо номер профілю не дає конкретних результатів, виконайте додаткові випробування, визначені виробником набору.

  • Поділитися
instagram viewer