Agar Slantları Hazırlamanın Beş Adımı

Agar, kırmızı alglerin saflaştırılmış hücre duvarlarından elde edilen jöle benzeri bir maddedir. Laboratuvarlarda mikroorganizmaların yetiştirildiği malzemeler olan mikrobiyolojik ortamlara maddeye daha sağlam bir yapı kazandırmak için eklenir. Agar'ın besin değeri yoktur, bu nedenle bilim adamları onu mikroorganizmaları kültürlemek için kullandıklarında, petri kaplarında veya test tüplerinde bakteri üremesini artırmak için çeşitli besinler eklerler. Araştırmacılar bakterileri bir test tüpünde sakladıklarında, sıvı büyüme ortamı tüp eğik konumdayken katılaştığı için buna agar eğimi denir. Eğimli bir vidalı kapak, agarın kurumasını önler.

Ortam, petri kaplarından daha eğimli olarak hazırlanır. Tüplerdeki agar ile sterilizasyon yapılır; petri kapları, sterilize edilmiş agar içlerine dökülmeden önce önceden sterilize edilir. Gerekli su miktarını ölçün ve bir Erlenmeyer şişesine koyun. Neredeyse kaynama noktasına gelene kadar ocakta ısıtın. Gerekirse diğer malzemeleri ekleyin ve karışımı yavaş yavaş ve sürekli olarak eriyene kadar karıştırın. Bu bileşenler, kültürlenen mikroorganizmanın türüne bağlı olarak sığır özü, pepton ve pH tamponlarını içerebilir.

Susuz agar tozunu eklemeden önce topaklanmayı önlemek için az miktarda soğuk damıtılmış su ile karıştırın. Sıcak sıvıya agar eklerken dikkatli olun çünkü köpürebilir ve tencereden taşabilir. Bir seferde az miktarda agar ekleyin ve agarı eşit olarak dağıtmak için karıştırın. Karışım buharlaşmaya başladığında, kaynamadan önce ısıyı kapatın.

Kapaksız test tüplerini bir test tüpü rafına yerleştirin. Steril bir pipet kullanarak erimiş agardan yaklaşık 5 mililitre - yaklaşık 0.17 ons veya 1 çay kaşığı - aktararak test tüplerini doldurun. Sıkıca kapatılırsa agar sterilize edilmeyeceğinden, test tüplerinin her birinin kapağını gevşekçe kapatın. Tüm tüpleri bir otoklavda 121 santigrat derece veya 250 derece Fahrenhayt'ta yaklaşık 25 dakika sterilize edin.

Agar hala sıcakken, test tüplerini katı bir yüzey veya bir kalın kitap, tüplerin içindeki ortamın teste göre eğimli bir konumda olduğundan emin olun tüpler. Agarın yüzey alanını artıran bu açıda ortamın soğumasına ve katılaşmasına izin verin. Agar soğuduktan sonra test tüplerinin kapaklarını sıkın. Agar katılaştıktan sonra eğimler kullanıma hazırdır. Gelecekte kullanılmak üzere oda sıcaklığında veya buzdolabında saklanabilirler.

Bir plaka üzerindeki tek kolonili bir mikroorganizmadan bir aşılama halkası ile hücreleri slant yüzeyine aktararak slantı aşılayın. Döngüyü eğimin yüzeyi boyunca hareket ettirin ve tüpleri yeniden kapatın. Büyüme kanıtı olana kadar eğik inkübe edin, ardından tüpü buzdolabına koyun.

  • Paylaş
instagram viewer