HPLC, bir numunedeki belirli kimyasal bileşenleri tanımlamak için hızlı, otomatik ve oldukça hassas bir yöntem sunar, ancak maliyetli, karmaşık olabilir ve tüm numuneler için çalışmayabilir. Tıbbi, adli, çevre ve üretim laboratuvarları, bir numunedeki kimyasalları ölçmek ve ayırmak için bu tekniği kullanır. HPLC'nin diğer tekniklerle karşılaştırıldığında hem avantajları hem de dezavantajları vardır.
HPLC ve Benzer Teknikler
Diğer kromatografi biçimleri gibi, HPLC de bir hareketli faz ve bir sabit faz kullanılarak kimyasal bileşenlerin ayrılmasına izin verir. Hareketli faz sıvı, durağan faz ise katıdır. Farklı bileşenler farklı hızlarda hareket ettikleri için birbirlerinden ayrılırlar. Alternatif teknikler, maddelerin bir elektrik ortamında çözeltiler boyunca göç ettiği kapiler elektroforezi içerir. alan ve katı faz ekstraksiyonu, gaz kromatografisi ve ince tabaka gibi diğer kromatografik yöntemler kromatografi.
Hız, Verimlilik ve Doğruluk
TLC gibi diğer kromatografik tekniklerle karşılaştırıldığında, HPLC son derece hızlı ve verimlidir. Sıvı bir çözücüyü katı bir adsorban materyalden zorlamak için yerçekimi yerine bir pompa kullanır, farklı kimyasal bileşenler farklı hızlarda hareket ettikçe ayrılır. İşlem yaklaşık 10 ila 30 dakika arasında tamamlanabilir ve yüksek çözünürlük sunar. Doğru ve yüksek oranda tekrarlanabilir. Büyük ölçüde otomatik olduğu için, temel HPLC çalıştırmaları minimum eğitim ile gerçekleştirilebilir.
Maliyet ve Karmaşıklık
Avantajlarına rağmen, HPLC pahalı olabilir ve büyük miktarlarda pahalı organikler gerektirir. Katı faz ekstraksiyonu ve kılcal elektroforez gibi teknikler, özellikle iyi üretim uygulamaları altında yapılan analizler için daha ucuz ve hatta daha hızlı olabilir. Mevcut HPLC yöntemlerini kullanmak nispeten kolay olsa da, sorunları gidermek veya yeni yöntemler geliştirmek karmaşık olabilir. Bu büyük ölçüde farklı modüller, sütunlar ve mobil fazlar dizisinden kaynaklanmaktadır.
Hassasiyet ve Çözünürlük
Genel olarak, HPLC çok yönlüdür ve kimyasal bileşenlerin tanımlanması ve ölçülmesi söz konusu olduğunda son derece hassastır. Dahil edilen birçok adımla, HPLC'nin kesinliği, büyük ölçüde otomatikleştirilmiş ve dolayısıyla yüksek oranda tekrarlanabilir olan prosese bağlıdır. HPLC, belirli bileşikler için düşük duyarlılığa sahiptir ve bazıları geri döndürülemez şekilde adsorbe edildikleri için tespit edilemez. Uçucu maddeler gaz kromatografisi ile daha iyi ayrılır.