วิธีย้อมไคติน

นักจุลชีววิทยาใช้การย้อมสีไคตินเพื่อให้เห็นเชื้อราได้ชัดเจนภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เชื้อราใช้ไคตินเป็นวัสดุโครงสร้างในผนังเซลล์ ดังนั้นคราบจะแสดงผนังเซลล์ได้ดี คราบคอตตอนบลูแลคโตฟีนอลเป็นคราบที่พบบ่อยที่สุดสำหรับเชื้อรา ฟีนอลฆ่าเชื้อจุลินทรีย์และป้องกันไม่ให้เอนไซม์เชื้อราทำลายเซลล์ สีย้อมผ้าฝ้ายสีน้ำเงินจะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินของไคติน การย้อมสีไคตินเป็นขั้นตอนที่ค่อนข้างตรงไปตรงมากับวัสดุราคาไม่แพง คุณสามารถทำสีย้อมของคุณเองหรือซื้อสีย้อมที่เตรียมในเชิงพาณิชย์ก็ได้

เตรียมสารละลายแลคโตฟีนอลคอตตอนบลู ชั่งน้ำหนักผ้าฝ้ายสีน้ำเงิน 0.05 กรัมโดยใช้เครื่องชั่งน้ำหนักที่ละเอียดอ่อน ผสมสีย้อมกับน้ำกลั่น 20 มิลลิลิตรในหลอดทดลองแล้วทิ้งไว้ค้างคืน

สวมถุงมือก่อนเสร็จสิ้นการเตรียมคราบในวันรุ่งขึ้น ใส่กรดแลคติก 20 มล. ลงในบีกเกอร์แล้วผสมกับผลึกฟีนอล 20 กรัม ผัดจนส่วนผสมละลาย เพิ่มในกลีเซอรอล 40 มล. และผสม จากนั้นกรองสารละลายคอตตอนบลูผ่านกระดาษกรองลงในบีกเกอร์แล้วผสมให้เข้ากัน

หรือใช้แหล่งกำเนิดของรอยเปื้อนที่เตรียมในเชิงพาณิชย์ เก็บรอยเปื้อนไว้ที่อุณหภูมิห้อง

ติดฉลากสไลด์กล้องจุลทรรศน์ด้วยชื่อหรือหมายเลขประจำตัวตัวอย่าง ใช้หยดหนึ่งหยดที่ปราศจากเชื้อเพื่อวางตัวอย่างน้ำหนึ่งหยดลงบนกึ่งกลางของสไลด์กล้องจุลทรรศน์ สำหรับตัวอย่างแบบแห้ง ให้หยดสารละลายแอลกอฮอล์ 70 เปอร์เซ็นต์ลงบนสไลด์ จากนั้นใช้ห่วงปลอดเชื้อเพื่อผสมตัวอย่างแห้งลงในแอลกอฮอล์

ใช้หยดหยดที่สะอาดเพื่อถ่ายคราบผ้าฝ้ายสีน้ำเงินแลคโตฟีนอลสองหยดลงบนกึ่งกลางของสไลด์ หากคุณกำลังใช้แอลกอฮอล์ 70 เปอร์เซ็นต์บนสไลด์ ให้ทำเช่นนี้ก่อนที่แอลกอฮอล์จะระเหยออกจากสไลด์

แตะขอบด้านหนึ่งของฝาปิดกล้องจุลทรรศน์กับขอบด้านหนึ่งของการเตรียมตัวอย่างแบบเปียก ปล่อยให้สลิปตกลงบนตัวอย่างการเตรียมอย่างเบา ๆ เพื่อให้แน่ใจว่าคุณจะไม่ดักจับฟองอากาศใต้สไลด์ ตัวอย่างสีพร้อมสำหรับการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แล้ว

  • แบ่งปัน
instagram viewer