แหล่งที่มาของข้อผิดพลาดในเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส

เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเป็นหนึ่งในวิธีการหลักที่ใช้ในอณูชีววิทยาสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอ วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการย้ายชิ้นส่วนของ DNA ผ่านเจล โดยแยกตามขนาดหรือรูปร่าง อย่างไรก็ตาม แม้แต่วิธีการที่มีเหตุผลทางวิทยาศาสตร์ เช่น เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสก็ไม่สามารถป้องกันข้อผิดพลาดได้

•••Jezperklauzen / iStock / Getty Images

เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสเกี่ยวข้องกับการใช้เจลที่มักทำจากโพลีเมอร์เช่นอากาโรส เจลแช่อยู่ในสารละลายบัฟเฟอร์ที่นำสนามไฟฟ้า ตัวอย่าง DNA ที่น่าสนใจจะถูกแยกส่วนออกก่อนโดยใช้เอ็นไซม์จำกัด จากนั้นจึงฉีดเข้าไปในเจล เมื่อเปิดสนามไฟฟ้า ชิ้นส่วนดีเอ็นเอในเจลจะย้ายไปยังขั้วบวก หากชิ้นส่วน DNA มีขนาดต่างกัน เวลาในการย้ายจะแตกต่างกันสำหรับชิ้นส่วนขนาดแต่ละชิ้น จากนั้นจึงมองเห็นชิ้นส่วนต่างๆ โดยใช้สีย้อมหรือออโตเรดิโอกราฟี และมองเห็นได้เป็นแถบในเจล

•••aiaikawa / iStock / Getty Images

การประยุกต์ใช้อิเล็กโตรโฟรีซิสที่สำคัญเป็นเครื่องมือสำหรับการวิเคราะห์ DNA ในอณูชีววิทยา แต่ยังใช้ในการพิสูจน์หลักฐานเพื่อระบุตัวอย่างจากที่เกิดเหตุ สิ่งสำคัญคือต้องลดแหล่งที่มาของข้อผิดพลาดในเทคนิคนี้ให้น้อยที่สุดเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ถูกต้อง ข้อผิดพลาดประการหนึ่งคือการปนเปื้อนของตัวอย่างดีเอ็นเอ หากมี DNA แปลกปลอมในตัวอย่าง เจลจะมีแถบมากกว่าที่พบในเจลที่มีเฉพาะตัวอย่างที่ทำให้บริสุทธิ์

•••รูปภาพ IndiaImages / iStock / Getty

ความเข้มข้นของเจลจะต้องถูกต้องเพื่อหลีกเลี่ยงข้อผิดพลาด หากความเข้มข้นสูงหรือต่ำเกินไป ชิ้นส่วนจะย้ายช้าหรือเร็วเกินไป ซึ่งจะทำให้เกิดข้อผิดพลาดในการแก้ไขย่านความถี่ต่างๆ ในระหว่างการดำเนินการอิเล็กโตรโฟรีซิส ต้องใช้ความระมัดระวังเพื่อให้แน่ใจว่าแรงดันไฟฟ้าคงที่ ความผันผวนของแรงดันไฟฟ้าจะส่งผลให้ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเคลื่อนที่ไม่เสถียร ทำให้เกิดข้อผิดพลาดในการอ่านแถบ สารละลายบัฟเฟอร์ต้องมีองค์ประกอบที่ถูกต้องด้วย เนื่องจากบัฟเฟอร์ที่มีค่า pH ไม่ถูกต้องหรือความเข้มข้นของไอออนิกจะเปลี่ยนรูปร่างของชิ้นส่วนดีเอ็นเอ และเปลี่ยนเวลาการย้ายถิ่นด้วย

•••สำนักพิมพ์ Ingram / สำนักพิมพ์ Ingram / Getty Images

สิ่งสำคัญที่สุดคือต้องมองเห็นเจลอย่างถูกต้อง หากความเข้มข้นของสีย้อมหรือโพรบกัมมันตภาพรังสีที่ใช้ในการแสดงภาพตัวอย่างสูงเกินไป ภาพที่ได้จะยุ่งเหยิงมาก เนื่องจากเศษที่เหลือจะถูกมองเห็นด้วย หากความเข้มข้นของเจลต่ำเกินไป จะไม่มีการสร้างภาพข้อมูล เมื่อปฏิบัติตามกระบวนการที่ถูกต้องในทุกขั้นตอน เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสจะให้ผลลัพธ์ที่แม่นยำและใช้งานได้อย่างมั่นใจ เช่นเดียวกับขั้นตอนทางวิทยาศาสตร์ทั้งหมด เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสมีแนวโน้มที่จะเกิดข้อผิดพลาด แต่สิ่งเหล่านี้สามารถลดลงได้ด้วยการเตรียมและการจัดการที่เหมาะสม