Forskare och forskare studerar bakterietillväxt genom att förbereda kulturer i ett laboratorium. Petriskålar som innehåller näringsagar odlar bakteriekulturer från en enda svepning eller ympning. Studenter kan förbereda näringsagar hemma med hjälp av förnödenheter från livsmedelsbutiker eller hälsokostaffärer för ett vetenskapligt mässprojekt. Konventionella köksredskap och grundläggande köksutrustning ger verktygen för att förbereda ett sterilt odlingsmedium som kan fördelas i petriskålar. Att följa sterila tekniker genom att värma upp materialen och hålla ytorna rena och torra kommer att förbättra resultaten genom att förhindra mögel och partiklar från att förorena kulturen.
Lägg ett kaffefilter i en sil och häng silen över öppningen på den genomskinliga skålen.
Häll långsamt buljongen i filtret och se till att buljongen inte rinner över från sidorna på filtret. Om filtret är igensatt med partiklar, ta bort det använda filtret, byt ut det mot ett rent filter och fortsätt att hälla buljongen.
Ta bort silen och filtret från toppen av skålen och observera om buljongen verkar vara klar (dvs. det finns inga suspenderade partiklar i vätskan). Om partiklar flyter i vätskan, upprepa steg 1 och 2 med en andra klar skål och ett nytt kaffefilter.
Lägg krukan på spisen och häll den klara buljongen i krukan.
Tillsätt 16 uns destillerat vatten i potten som innehåller buljongen.
Sätt på kaminen och justera värmen till medium-låg. Värm buljongen till en simmer (dvs. små bubblor dyker upp nära sidan av potten).
Tillsätt 1 tesked agar-agarpulver till den sjudande buljongen (cirka 2,5 gram) och rör om blandningen tills pulvret är upplöst. Se till att rör om pulvret för att lösa upp och förhindra att gelatinet sjunker till botten av potten (där det kan brinna).
Upprepa steg 7 tills allt agar-agarpulver har lösts upp i buljongen.
Fortsätt att omröra buljongen i ca 1 minut för att säkerställa att allt pulver är helt upplöst.
Stäng av spisen, lägg locket på potten och låt vätskan svalna i minst 15 minuter.
Ordna de sterila petriskålarna i rad för enkel montering, men ta inte bort locken. Om du vill kan du placera en nagel för att hålla den varma krukan. Om du använder vaniljsås koppar istället för petriskålar, sterilisera vaniljsås koppar genom att placera koppar och lock inverterad (upp och ner) på ett folietäckt kakplåt och baka i ugnen i minst en timme vid 375 grader Fahrenheit. Se till att de steriliserade kopparna och locken har svalnat helt före användning.
Rör försiktigt utsidan av potten för att kontrollera att den är varm vid beröring och placera potten på nageln. Om potten är för varm att röra vid, vänta minst 10 minuter för att låta potten svalna.
Ta bort locket och lägg åt sidan. Placera sleven i potten.
Ta bort locket från en petriskål och fördela näringsbuljong för att fylla skålen halvvägs. Täck skålen omedelbart med locket.
Upprepa steg 14 för var och en av petriskålarna.
Låt näringsbuljongen stelna i petriskålarna i minst 1 timme, ostörd.
Skaka försiktigt petriskålarna sida vid sida för att kontrollera att näringsbuljongen har stelnat helt. Om buljongen inte är helt gelad, vänta ytterligare 20 minuter innan du kontrollerar igen.
Täck ett bord eller en plan yta med en rulle pappershanddukar för att skapa ett sterilt arbetsområde. Riv av ett pappershandduk och vik det fyra gånger för att skapa en tjock, rektangulär vaddering. Ställ det här vattnet i ena änden av arbetsområdet.
Överför en petriskål till det sterila arbetsområdet och ta bort locket. Vänd försiktigt skålen och placera den ena änden på sidan av det vikta vadet, så att det ligger inverterat och något vinklat (med ett litet mellanrum i pappershandduken).
Vänd locket och placera det ovanför petriskålen på den sterila arbetsytan. Om vattendroppar förekommer på locket, skaka av fukten försiktigt innan du placerar den på den täckta ytan, men rör inte vid insidan av locket.
Upprepa steg 19 och 20 för varje petriskål och placera den ena sidan av den inverterade skålen på sidan av föregående skål snarare än pappershandduken. Disken kommer att se ut som en förskjuten uppsättning, med luckor på ena sidan så att överflödig fukt kan avdunsta.
Titta på de inverterade petriskålarna för att kontrollera om fukten på plattans sidor avdunstade. När all fukt har klarat, vrid plattorna med höger sida upp och täck omedelbart med locken för användning.
Inokulera näringsagaren på plattan genom att torka av en pinne som innehåller önskad kultur på näringsagarytan innan du täcker med locket. Vänd petriskålen så att fastämnet är på toppen. Förvara den inokulerade petriskålen med det fasta materialet ovanpå för odling och locket på botten för att fånga upp fukt, lösa partiklar eller tillväxt.
Saker du behöver
- Kaffe filter
- Sil
- 2 stora, klara skålar
- 16 oz. fettfri nötköttsbuljong
- 16 oz. destillerat vatten
- Kokkärl med lock
- Spis
- 10 gram agaragar
- Mätsked
- Omrörare
- Rulle pappershanddukar
- Grytlappar
- Metall slev
- Sterila petriskålar eller klara vaniljsås med lock
- Tillval: timer, ugn, ugn, panna, aluminiumfolie, panna
Tips
Om överdriven fukt förekommer på locken, torka och sterilisera locken i ugnen inställd på 375 grader Fahrenheit under minst 1 timme (se till att placera locken i en ren panna kantad med aluminiumfolie innan du sätter dem i ugn).
Varningar
-
Var försiktig när du hanterar den heta potten för att undvika brännskador. Om sidan på potten är för varm är vätskan i potten väldigt varm. Näringsbuljongen bör vara varm för att fördelas i disken, men inte för varm för att producera överdriven kondens i petriskålarna under kylning och härdning.
Rör inte insidan av petriskålen (dvs tallrik eller lock) för att undvika att oönskade bakterier införs i kulturen.