Fördelarna med färgade bakterier

Mikrobiologer studerar egenskaper hos mikroorganismer såsom alger, protozoer, bakterier, svampar och virus med hjälp av ett mikroskop. Medan vissa organismer som protozoer och jästceller är lätta att observera med våtfäste, kräver bakterieceller färgning. Forskare utvecklade flera metoder som gramfärgning, syrafast färgning och fluorescerande färgning för bättre visualisering av bakterieceller och cellulära strukturer. Med hjälp av sådana färgningsmetoder är det möjligt att identifiera strukturella egenskaper som hjälper till att klassificera bakterier.

Bakterieorganismer är så små att de flesta är synliga endast under ett mikroskop med en förstoringseffekt av 1000X. Enbart förstoring av storleken ger emellertid inte tillräcklig klarhet, så att bakterier därför måste färgas före observation för att ge den tydlighet som behövs för visualisering.

Färgningsbakterier för att skilja mellan bakterietyper kallas differentiell färgning. Gram-fläcken är en sådan differentiell fläck som skiljer mellan bakterier på grundval av deras cellväggsinnehåll. I denna metod reagerar bakteriecellerna med en kristallviolett fläck för att få en violett färg. När man tillsätter ett avfärgningsmedel tappar vissa bakterieceller färg medan andra inte gör det. Efter att ha tillsatt safraninfärgning tar de avfärgade cellerna upp fläcken för att verka röda medan bakteriecellerna som inte tappar färg förblir violetta. De bakterieceller som tar upp den röda färgen kallas gramnegativa organismer och de som inte tar upp färgen klassificeras som grampositiva organismer. Gramfärgning ger en snabb metod för initial identifiering av bakterier som är involverade i infektioner. På samma sätt hjälper den syrafasta färgningsproceduren att specifikt identifiera organismer som tillhör den klass av bakterier som kallas Mycobacteria, såsom Mycobacterium tuberculosis.

I bakteriekulturprover är det ofta viktigt att detektera närvaron av levande bakterieceller. Färgningsmetoder som fluorescerande färgning hjälper till att identifiera om odlingsceller är livskraftiga eller inte. Levande bakterier har förmågan att omvandla 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride (CTC) -färg till ett färgämne som visar en röd fluorescens. Därför, när kulturer färgade med CTC avger sådan fluorescens, indikerar det närvaron av livskraftiga bakterier. Propidiumjodid är en fläck som endast verkar på icke-levande celler som har skadade membran och är därför användbar för att identifiera döda bakterieceller.

Färgning ger en metod för att tydligt visualisera flera cellulära strukturer. Till exempel möjliggör Fuelgen-färgningsmetoden identifiering av kärnan i bakterieceller medan Albert's fläck är användbar för att visualisera metakromatiska granuler. På samma sätt möjliggör silverimpregneringstekniken identifiering av spiroketer. Flagella är lätta att observera när de fläckas med Ryus fläck. Malakitgrön färgning hjälper till att identifiera bakteriesporer.