Enterobacter aerogenes och andra arter av Enterobacteriaceae är lätta att identifiera med hjälp av API-20E testkit. Detta kit, tillverkat av bioMeriuex Inc., innehåller 20 minirör eller brunnar för testet. Testet består av att yta en ren bakteriesuspension i testbrunnarna och läsa av de färgreaktioner som uppstår. Identifiering bygger på att konvertera resultaten av dessa färgreaktioner till en sjusiffrig kod som kallas Analytical Profile Index. Att matcha den här koden med tillverkarens databas ger en identifiering av organismen.
Öppna en ampull innehållande 5 ml natriumklorid 0,85 procent medium. Ta bort en enda koloni från en 18 till 24-timmars gammal isoleringsplatta med en pipett och lägg den i ampullen. Blanda för att erhålla en homogen suspension. Använd denna upphängning så snart du har förberett den.
Sätt upp en inkubationsbox som består av bikakor i en bricka med lock. Öppna lådan och tillsätt 5 ml avmineraliserat eller destillerat vatten i brickbrunnarna. Packa upp remsan som tillhandahålls i API 20E-testsatsen och placera den i inkubationsrutan.
Fyll röret och koppen på brunnarna märkta "GEL", "VP" och "CIT" med den suspension du har förberett. I de återstående brunnarna fyller du bakteriesuspensionen i röret men inte i kupolen. Tillsätt mineralolja i brunnarna märkta "ADH", "ODC", "LDC", "URE" och "H2S" för att skapa en anaerob miljö.
Täck inkubationsboxen med locket och inkubera vid en temperatur mellan 34 och 38 grader Celsius i 18 till 24 timmar.
Observera brunnarna och notera reaktionerna på resultatbladet. Förutsatt att minst tre tester är positiva, fortsätt till färgreaktionerna med de kemiska testlösningarna eller reagensen som medföljer satsen. Tillsätt en droppe TDA-reagens i den väl märkta "TDA" och en droppe vardera av VP1- och VP2-reagens i väl märkta "VP." Om färre än tre tester blev positiva, inkubera remsorna i ytterligare 24 timmar innan du lägger till dessa reagens.
Observera de färgförändringar som produceras i brunnarna. En rödbrun färg i TDA indikerar en positiv reaktion. Vänta i 10 minuter efter att ha tillsatt reagenser från satsen i VP1 och VP2. Betrakta en röd eller rosa färg som positiv och en blekrosa färg som visas efter 10 minuter som negativ.
Utför oxidastestet som anges av tillverkaren av satsen och registrera dess resultat tillsammans med resultaten från de tidigare 20 testerna.
Mata in detta sjusiffriga profilnummer i kit-tillverkarens databas via en pekfunktionstelefon. Vänta med att få den identifikation som tillhandahålls av databasen. Om profilnumret inte ger specifika resultat, utför de kompletterande tester som anges av tillverkaren av satsen.