HPLC erbjuder en snabb, automatiserad och mycket exakt metod för att identifiera vissa kemiska komponenter i ett prov, men det kan vara kostsamt, komplext och fungerar inte för alla prover. Medicinska, kriminaltekniska, miljö- och tillverkningslaboratorier använder tekniken för att kvantifiera och separera kemikalierna i ett prov. HPLC har både fördelar och nackdelar jämfört med andra tekniker.
HPLC och liknande tekniker
Liksom andra former av kromatografi tillåter HPLC separering av kemiska beståndsdelar genom användning av en mobil fas och en stationär fas. Den mobila fasen är flytande och den stationära fasen är fast. Eftersom de olika komponenterna rör sig i olika hastigheter skiljer de sig från varandra. Alternativa tekniker inkluderar kapillärelektrofores, där ämnen migrerar genom lösningar i en elektrisk fält och andra kromatografiska metoder, såsom fastfasextraktion, gaskromatografi och tunt skikt kromatografi.
Hastighet, effektivitet och noggrannhet
Jämfört med andra kromatografiska tekniker, såsom TLC, är HPLC extremt snabb och effektiv. Den använder en pump, snarare än tyngdkraften, för att tvinga ett flytande lösningsmedel genom ett fast adsorberande material, med olika kemiska komponenter som separerar när de rör sig i olika hastigheter. Processen kan slutföras på ungefär 10 till 30 minuter och ger hög upplösning. Det är korrekt och mycket reproducerbart. Eftersom den till stor del är automatiserad kan grundläggande HPLC-körningar utföras med minimal träning.
Kostnad och komplexitet
Trots dess fördelar kan HPLC vara kostsamt och kräver stora mängder dyra organiska ämnen. Tekniker som extrakt av fast fas och kapillärelektrofores kan vara billigare och ännu snabbare, särskilt för analys under god tillverkningssed. Även om det är relativt enkelt att använda befintliga HPLC-metoder kan det vara komplicerat att felsöka problem eller att utveckla nya metoder. Detta beror till stor del på utbudet av olika moduler, kolumner och mobilfaser.
Känslighet och upplösning
I allmänhet är HPLC mångsidig och extremt exakt när det gäller att identifiera och kvantifiera kemiska komponenter. Med många inblandade steg beror precisionen på HPLC till stor del på att processen är automatiserad och därför mycket reproducerbar. HPLC har låg känslighet för vissa föreningar, och vissa kan inte detekteras eftersom de irreversibelt adsorberas. Flyktiga ämnen separeras bättre genom gaskromatografi.
