Хемичари користе течну хроматографију високих перформанси или ХПЛЦ за одвајање смеша једињења. Генерално, метода се састоји од убризгавања узорка у колону где се меша са једним или више растварача. Различита једињења различито се адсорбују или „лепе” на колони; и како растварач гура једињења кроз колону, једна од компонената смеше ће прва изаћи из колоне. Инструмент детектује једињења док излазе из колоне и производи хроматограм који се састоји од графикона са временом задржавања на к-оси и интензитетом сигнала од детектора на и-оси. Како једињења излазе из колоне, они стварају „врхове“ на хроматограму. Генерално, што су даље и што су врхови на хроматограму ужа, то је већа резолуција. Научници сматрају да резолуција 1,0 или већа представља адекватно раздвајање.
Измерите ширину два суседна врха на хроматограму бележећи где су вредности к-осе у основи сваког врха. Ос к представља време задржавања, обично мерено у секундама. Дакле, ако врх почиње у 15,1 секунде и завршава се у 18,5 секунди, његова ширина је (18,5 - 15,1) = 3,4 секунде.
Одредите време задржавања бележећи време, тј. Локацију на к-оси, која одговара местима максимума врхова. Ова вредност ће обично бити отприлике на пола пута између две вредности коришћене за израчунавање ширине у кораку 1. Пример дат у кораку 1, на пример, показао би максимум око 16,8 секунди.
Израчунајте резолуцију Р између два врха:
Р = \ фрац {РТ_1-РТ_2} {0,5 (В_1 + В_2)}
где РТ1 и РТ2 представљају време задржавања врхова 1 и 2 и В1 и В2 представљају ширине врхова заузетих у њиховим основама. Настављајући пример из корака 2 и 3, један врх показује време задржавања од 16,8 секунди и ширину од 3,4 секунде. Ако би други врх показивао време задржавања од 21,4 секунде са ширином од 3,6 секунди, тада би резолуција била:
Р = \ фрац {21,4-16,8} {0,5 (3,4 + 3,6)} = 1,3
Ствари које ће вам требати
- ХПЛЦ хроматограм
- Калкулатор