Клонирање ТА је једноставна и погодна метода субклонирања производа полимеразне ланчане реакције (ПЦР). „ТА“ је скраћеница од „тимин“ и „аденин“. Ова техника клонирања користи способност тимина да хибридизује са аденином у присуству лигаза. Рестриктивни ензими се не користе, за разлику од традиционалне методе субклонирања. Уместо тога, ПЦР производи се појачавају помоћу ензима Так полимеразе.
Метод
Метода клонирања ТА користи терминалну активност трансферазе одређеног прелива деоксирибонуклеинске киселине на сваки крај ПЦР производа.
За клонирање овог ПЦР производа у плазмидни вектор користи се линеаризовани вектор клонирања са појединачним, три основна надвишења Т (3'-Т) названа Т-вектор. ПЦР производ је помешан са овим вектором у великом проценту.
Смеши се додаје ДНК лигаза (Т4 лигаза), која омогућава два производа да се хибридизују и споје.
Предности и мане
ТА клонирање је прикладна метода субклонирања ПЦР производа у линеаризованом вектору и много је једноставнија и бржа од традиционалних метода субклонирања. Пошто се у овој методи не користе рестрикциони ензими, производи без места рестрикционих ензима могу се клонирати.
Недостатак је што су комплети за клонирање ТА веома скупи и стога је њихова употреба ограничена. Поред тога, нема усмереног клонирања; па је већа вероватноћа клонирања у супротном смеру.
ТА комплети за клонирање
Неколико произвођача продаје ТА комплете за клонирање. Неки су Инвитроген, КИАГЕН и Премиер Биософт.
