Светлосни или сложени микроскоп је алат са којим ће се вероватно сусрести сваки студент биологије. Разумевање предности светлосног микроскопа даће увид у савладавање његове корисности за учионицу или клинику. Много експерименталних техника које су усавршене за употребу са светлосним микроскопом, његова једноставност употребе и његове релативно приступачна цена у поређењу са другим врстама микроскопа чине га најпожељнијим избором за многе науке о животу апликације.
Светлосна микроскопија и ћелијска биологија
Будући да се ћелије не могу гледати простим оком, микроскопија је кључна компонента за проучавање структуре и функције ћелија. Светлосни микроскоп користи извор светлости за осветљавање узорка на светлом пољу. Узорак је обојен да би структуре које су обично провидне или готово безбојне тамније од позадине и лакше их је видети. Друга техника микроскопије је флуоресцентна микроскопија. Уместо да користе тамну мрљу на светлој позадини, ћелије се боје флуоресцентним бојама и гледају на тамној позадини.
Развијено на десетине експерименталних поступака
Проучавање ткива помоћу светлосне микроскопије практикује се више од 50 година. Светлосна микроскопија је најприступачнији облик микроскопије широм света и још увек је један од главних алати за обуку патолога или лекара који дијагностикују болести испитивањем микроскопског ткива структура. Хиљаде лабораторија широм света усавршиле су десетине експерименталних поступака, а многи од њих су доступни на бесплатан начин. Комбинација ниских трошкова и велике количине биолошких информација које пружа светлосни микроскоп чини га непроцењивим алатом за истраживање и медицину.
Хемијске мрље и светлосна микроскопија
За посматрање узорка под светлосном микроскопијом потребна је помоћ шарених хемијских мрља. Ове плаве, црвене, зелене и смеђе мрље фиксирају се на ткиво помоћу бистре хемикалије зване пермоунт, која се стврдњава када је изложена ваздуху. Тако комбиноване, ове хемијске мрље и ткива трају много година не бледећи, омогућавајући научницима да дуго истражују исти примерак без губитка боје. Губитак видљивости је ограничење флуоресцентне микроскопије јер флуоресцентне боје временом бледе.
Једноставност зумирања
Способност сложеног микроскопа да лако зумира између посматрања репа мале рибе у 50 пута већем од њега стварна величина да се виде артерије у њеном репу 400 пута већа од стварне величине нема премца код других врста микроскопи. Патолози испитују биопсије или мале комаде ткива уклоњене иглом под сложеним микроскопом и често зумирају и умањују како би дали најбољу процену. Сложени микроскоп остаје најбоља опција за ову врсту истраживања.
Предности флуоресцентне микроскопије
Флуоресцентна микроскопија пружа веће визуелне детаље гледаоцу, јер флуоресцентне боје могу циљати одређене структуре унутар ћелије. Флуоресцентни молекули у ћелијском узорку названи флуорофори апсорбују светлост на једној таласној дужини и емитују светлост различите таласне дужине. Флуоресцентне боје се могу користити са специфичним протеинима и антителима за истицање структура, па чак и појединачних молекула унутар ћелије. Технике флуоресцентне микроскопије омогућавају употребу више боја у узорку.
Недостатак светлосних микроскопа
Технологија микроскопије је експлодирала последњих деценија, а неки од напреднијих микроскопа пружају детаљније информације од класичног сложеног микроскопа. Флуоресцентни микроскопи омогућавају научницима да виде два различита протеина на истом месту у ћелији помоћу црвених и зелених маркера који се преклапају и формирају жуту боју. Електронски микроскопи показују тродимензионалне карактеристике површине ћелије. Да наведемо један недостатак светлосног микроскопа, он не поседује неке напредне могућности флуоресцентне или електронске микроскопије, јер користи само белу светлост. Међутим, електронски и флуоресцентни микроскопи варирају у цени од десетина хиљада до стотине хиљада долара, док се сложени микроскоп тренутно може купити за само $100.