Kaj je štetje v mikrobiologiji?

Mikrobiologija je preučevanje mikroorganizmov: mikroskopskih ali komaj vidnih enoceličnih oblik življenja, kot je bakterije, arheje, praživali in nekatere glive ter celo nekatere izredno majhne večcelične rastline, živali in glive. Mikrobiologi preučujejo tudi naravne neorganizemske pojave, kot so virusi, prioni, viroidi in viriji. "Mikrob" je izraz za vse te entitete. Štetje v mikrobiologiji je določitev števila posameznih sposobnih mikrobov v vzorcu; možne so štiri osnovne tehnike.

Eno neposredno merilo za naštevanje mikrobov je standardno število ploščic, imenovano tudi preživetje. Za to štetje vzorec vzgojite tako, da ga razredčite, položite na plošče gojišča in jih inkubirate določen čas. Nato preštejete število kolonij in s to številko ugotovite prvotno število mikrobov v vzorcu. Tehnično gledano število plošč ne daje števila posameznih mikrobov, temveč "tvorjenje kolonij" enot, "saj ne morete zagotovo vedeti, ali je vsaka kolonija dejansko prihajala iz enega samega mikroba ali iz majhne skupine mikrobi. Vendar se šteje, da je to število zelo natančno za oceno števila mikrobov v prvotnih vzorcih. Pomanjkljivosti so, da ta test zahteva veliko časa in prostora ter zahteva posebno opremo, ki mora biti pravilno pripravljena.

Neposredno mikroskopsko štetje, imenovano tudi skupno število celic, je druga oblika neposrednega naštevanja. Najprej vzorec razdelite na več enako velikih komor. Nato določite povprečno število mikrobov na komoro s štetjem nekaterih ali vseh pod mikroskopom. Na koncu to povprečje uporabite za izračun števila v prvotni enoti. Glavna pomanjkljivost neposrednega mikroskopskega štetja je, da je težko ločiti žive mikrobe od mrtvih, zato ta metoda morda ne bo dala natančnega izvedljivega naštevanja.

Preskusi motnosti so oblike posrednega naštevanja. Motnost je motnost tekočine. Pri turbidimetričnem merjenju daste vzorec v raztopino, izmerite oblačnost nove raztopine tako, da skoznjo posijete svetlobo s spektrofotometrom nato ocenite število živih mikrobov, ki bi bilo potrebno za ustvarjanje opazovane ravni oblačnosti. Pomanjkljivost pri tem je, da je nekdo že opravil številna standardna štetja plošč zadevnega mikroba da naredite vzorčne raztopine z različno motnostjo, tako da imate standard za merjenje trenutnega vzorca proti. Paziti morate tudi prekomerne koncentracije vzorca, ker je turbidimetrično število natančno le, če noben mikrob v vzorcu ne blokira nobenega drugega. V vizualni primerjavi motnosti primerjate motnost vzorca z motnostjo enote enake velikosti in znanega števila mikrobov in na podlagi te primerjave ocenite število.

Dve drugi obliki posrednega naštevanja sta določanje mase in merjenje mikrobne aktivnosti. Za naštevanje mase določite količino biološke snovi v vzorcu, primerjajte to maso na standardno krivuljo za znano število mikroorganizmov in na podlagi tega ocenite prvotno mikrobno število primerjava. Za merjenje mikrobne aktivnosti izmerite količino biološkega proizvoda v vzorcu, na primer presnovnih odpadkov, nato to primerjajte s standardno krivuljo za znano število in na podlagi tega ocenite svoje štetje primerjava.