Čeprav jih s prostim očesom ni mogoče videti, so bakterije povsod. Obstajajo v hrani, tleh, vodi, na površinah v naših domovih ter v naših telesih in na njih. Bakterije na splošno obstajajo v mešanih populacijah. Izolacija določene bakterije iz drugih bakterijskih vrst v določenem vzorcu omogoča mikrobiologom, da preučijo njeno strukturo in delovanje ter značilnosti, uporabljene pri njeni identifikaciji. Mikrobiologi pogosto izolirajo bakterije z uporabo ene od več tehnik ploščastih plošč.
Orodja
Inokulacijska zanka se uporablja za prenos mikroorganizmov. Sestavljen je iz nikromove ali platinaste žice z majhno krožno zanko na enem koncu. Drugi konec je raven in zdrsne v ročaj. Na voljo so tudi plastične zanke za enkratno uporabo. Bakterije je mogoče izolirati le, če rastejo. Mikrobiologi gojijo bakterije za izolacijo ploščastih plošč v plitvih, okroglih petrijevkah, napolnjenih s trdnim medijem, imenovanim agar. Agar posnema okolje, v katerem bakterije naravno rastejo. Medijsko posode so sterilne in pokrite, da se prepreči rast neželenih organizmov. Med izolacijo ploščaste plošče se cepilna zanka večkrat sterilizira v plamenu Bunsenovega gorilnika.
Načelo
Tehnika ploščastih plošč je najbolj priljubljena metoda za izolacijo določenih bakterij iz vzorca, ki vsebuje mešanico mikroorganizmov. Tehnika bistveno zmanjša število organizmov in zmanjša njihovo gostoto. Mikrobiologom omogoča, da ločijo in izolirajo posamezne kolonije bakterij. Kolonija je vidna skupina bakterij. Vse bakterije v eni koloniji izvirajo iz iste bakterijske celice. Posledično so posamezne kolonije "čiste" kolonije. Čista kolonija se prenese na drugo ploščo, da nastane čista kultura, sestavljena iz ene vrste bakterij.
Postopek
Če se pravilno izvede, se izolacija tanke plošče razredči in vzame posamezne bakterijske celice v izolirane kolonije. Mikrobiolog začne s sterilizacijo cepilne zanke v plamenu. Zanko ohladi tako, da se jo dotakne agarja, nato pa jo potopi v vzorec in razprostira naprej in nazaj, da pokrije del plošče. Zanko sterilizira, ohladi in z vlečenjem inokulira drugi sosednji del plošče zanko skozi prvi odsek večkrat, drugi odsek pa prek cik-cak gibanje. Ta iz prvega odseka pobere majhno število bakterij in jih prenese v drugi del. Število ponovitev tega osnovnega postopka je odvisno od uporabljene metode trakastih plošč. Kljub metodi se z originalnim vzorcem cepi samo prvi del plošče.
Metoda ploščaste plošče
Metode ploščastih plošč se razlikujejo glede na število proge odsekov agarja. Metoda T-streak uporablja tri odseke: zgornjo polovico in dva enako velika spodnja odseka. Začetni inokulum je nameščen v zgornji polovici plošče. Bakterije se vlečejo od zgornjega dela do enega od spodnjih delov, nato pa od spodnjega dela do drugega. Pri metodi kvadranta so štirje enako veliki odseki progasti. Metoda neprekinjenega proženja običajno vključuje cepljenje zgornje polovice plošče z vrtenjem za 180 stopinj, in cepljenje druge polovice plošče brez sterilizacije zanke ali vlečenja bakterij iz prejšnje odsek.
