Znanstveniki in raziskovalci preučujejo rast bakterij s pripravo kultur v laboratoriju. Petrijevke, ki vsebujejo hranilni agar, gojijo bakterijske kulture z enim potezom ali inokulacijo. Študenti lahko doma pripravijo hranilni agar z zalogami iz trgovin ali trgovin z zdravo hrano za projekt znanstvenega sejma. Običajni kuhinjski aparati in osnovna kuhinjska posoda zagotavljajo orodja za pripravo sterilnega gojišča, ki ga lahko dodamo v petrijevke. Upoštevanje sterilnih tehnik s segrevanjem materialov in vzdrževanjem čistih in suhih površin bo izboljšalo rezultate s preprečevanjem onesnaženja kulture s plesnijo in delci.
Filter za kavo postavite v cedilo in sito obesite nad odprtino prozorne posode.
Počasi vlijemo juho v filter in pazimo, da juha ne bo prelila s strani filtra. Če se filter zamaši z delci, odstranite uporabljeni filter, ga zamenjajte s čistim in nadaljujte z dolivanjem juhe.
Odstranite cedilo in filter z vrha posode in opazujte, ali se juha zdi bistra (tj. V tekočini ni nobenih suspendiranih delcev). Če delci plavajo v tekočini, ponovite 1. in 2. korak z drugo prozorno posodo in filtrom za svežo kavo.
Lonec postavite na štedilnik in v lonec nalijte bistro juho.
V lonec z juho dodajte 16 unč destilirane vode.
Vklopite peč in nastavite toploto na srednje nizko. Juho segrejte do vrenja (tj. Ob strani lonca se pojavijo majhni mehurčki).
V vrelo juho dodajte približno 1 čajno žličko prahu agar-agar (približno 2,5 grama) in mešajte mešanico, dokler se prašek ne raztopi. Mešajte prašek, da se raztopi in preprečite, da bi se želatina spustila na dno posode (kjer lahko gori).
Ponavljajte 7. korak, dokler se ves agar-agar v prahu ne raztopi v juhi.
Mešajte juho približno 1 minuto, da zagotovite, da se ves prah popolnoma raztopi.
Izklopite peč, postavite pokrov na lonec in pustite, da se tekočina ohladi vsaj 15 minut.
Za lažje sestavljanje sterilne petrijevke postavite v vrsto, vendar ne odstranjujte pokrovov. Če želite, postavite trojko, da držite topel lonec. Če namesto petrijevk uporabljate skodelice s kremo s pokrovom, jih sterilizirajte tako, da postavite skodelice in pokrove obrnjeno (na glavo) na folijo pokriti piškotek in pečemo v pečici vsaj eno uro pri 375 stopinjah Fahrenheit. Pred uporabo se prepričajte, da so sterilizirane skodelice in pokrovi popolnoma ohlajeni.
Previdno se dotaknite zunanje strani lonca, da preverite, ali je topla na dotik, in postavite lonec na posteljnino. Če je lonec prevroč na dotik, počakajte vsaj 10 minut, da se lonec ohladi.
Odstranite pokrov in ga odstavite. Položite zajemalko v lonec.
Odstranite pokrov z ene petrijevke in dolijte hranilno juho, da posodo napolnite do polovice. Posodo takoj pokrijemo s pokrovom.
Ponovite 14. korak za vsako petrijevko.
Pustite, da se hranilna juha nemoteno strdi v petrijevkah vsaj 1 uro.
Petrijevke nežno stresite ob strani, da preverite, ali se hranilna juha popolnoma strdi. Če juha ni popolnoma želirana, počakajte še 20 minut, preden ponovno preverite.
Pokrijte mizo ali ravno površino z zvitkom papirnatih brisač, da ustvarite sterilno delovno območje. Odtrgajte list papirnate brisače in ga štirikrat prepognite, da dobite gosto, pravokotno gmoto. Nastavite to gredo na en konec delovnega območja.
Eno petrijevko prenesite na sterilno delovno mesto in odstranite pokrov. Posodo previdno obrnite in en konec položite na stran zložene vate, tako da leži obrnjeno in rahlo pod kotom (z rahlim razmikom pri papirnati brisači).
Pokrov obrnite in ga postavite nad petrijevko na sterilno delovno površino. Če se na pokrovu pojavijo kapljice vode, nežno stresite to vlago, preden jo položite na pokrito površino, vendar se ne dotikajte notranjosti pokrova.
Ponovite koraka 19 in 20 za vsako petrijevko, pri čemer namestite eno stran obrnjene posode na stran prejšnje posode in ne na papirnato brisačo. Posode bodo prikazane kot razporejeni niz, z režami na eni strani, tako da lahko odvečna vlaga izhlapi.
Oglejte si obrnjene petrijevke, da preverite, ali je vlaga na straneh krožnikov izhlapela. Ko se vsa vlaga očisti, ploščo obrnite desno navzgor in takoj pokrijte s pokrovi za uporabo.
Hranljivi agar inokulirajte na ploščo tako, da obrišete tampon, ki vsebuje želeno kulturo, na površino hranilnega agarja, preden ga pokrijete s pokrovom. Petrijevko obrnemo tako, da je trdna snov na vrhu. Cepljeno petrijevko shranite s trdno snovjo na vrhu za gojenje in pokrovom na dnu, da ujamete vlago, rahle delce ali rast.
Stvari, ki jih boste potrebovali
- Kavni filtri
- Cedilo
- 2 veliki, prozorni skledi
- 16 oz. goveja juha brez maščobe
- 16 oz. destilirana voda
- Kuhalnik s pokrovom
- Štedilnik
- 10 gramov agar agar
- Merilna žlica
- Mešalnik
- Zvitek papirnatih brisač
- Držala za lonce
- Kovinska zajemalka
- Sterilne petrijevke ali prozorne skodelice kreme s pokrovi
- Izbirno: časovnik, trivet, pečica, ponev, aluminijasta folija, ponev
Nasveti
Če se na pokrovih pojavi prekomerna vlaga, jih posušite in sterilizirajte v pečici, nastavljeni na 375 stopinj Celzija najmanj 1 uro (pred namestitvijo pokrovčkov položite v čisto posodo, prevlečeno z aluminijasto folijo pečica).
Opozorila
-
Pri ravnanju z vročim loncem bodite previdni, da se ne opečete. Če je stran lonca prevroča, je tekočina v loncu zelo vroča. Hranilna juha mora biti topla, da jo lahko dovajate v posodo, vendar ne prevroča, da se med ohlajanjem in strjevanjem v petrijevkah pojavi kondenz.
Ne dotikajte se petrijevke (tj. Plošče ali pokrova), da ne pride do vnosa neželenih bakterij v kulturo.