Western blot test, imenovan tudi imunoblot, je test za določeno beljakovino v beljakovinski mešanici. Western blot test se opravi po gel-elektroforezi ali testu z encimskim imunskim testom (ELISA) in uporablja protitelesa za identifikacijo specifičnih beljakovin.
Elektroforeza v natrijevem dodecil sulfatu v poliakrilamidnem gelu (SDS-PAGE) je pogost test, ki se uporablja za ločevanje beljakovin za uporabo v Western blotu. Beljakovine se med premikanjem skozi matriko gela ločijo po teži in električnih lastnostih.
Test ELISA uporablja encime ali protitelesa, pritrjena na trdno površino, da ustvari preskusno površino. Nato se na preskusno površino doda vzorec. Protitelesa ali encimi, ki reagirajo ali se vežejo na beljakovine, kažejo na pozitiven rezultat.
Western blot test se opravi po gel-elektroforezi. Ločeni proteini se prenesejo (ali popivajo) na nitrocelulozne ali najlonske membrane in identificirajo s specifičnimi protitelesi, ki jih označi sekundarni protein.
Western blot test se uporablja za potrditev pozitivnih rezultatov bodisi gel-elektroforeze ali ELISA testov. Western blot test lahko natančneje prepozna beljakovine in izključi lažno pozitivne rezultate.