Mikrobiologinja uporablja obarvanje s hitinom, da lahko pod mikroskopom jasno vidi glivice. Glive uporabljajo hitin kot strukturni material v svojih celičnih stenah, tako da madež dobro kaže celično steno. Laktofenolski bombažni modri madež je najpogostejši madež za glive. Fenol ubija mikroorganizme in preprečuje, da bi glivični encimi razgradili celico. Bombažno modro barvilo postane hitin modro. Obarvanje s hitinom je razmeroma preprost postopek z poceni materiali. Lahko si naredite lastno barvilo ali kupite komercialno pripravljen madež.
Pripravite raztopino laktofenol bombažno modre barve. Z občutljivo tehtnico odtehtajte 0,05 grama bombažno modrega barvila. Barvilo zmešajte z 20 mililitri destilirane vode v epruveti in pustite čez noč.
Nadenite rokavice, preden naslednji dan končate s pripravo madežev. V čašo damo 20 ml mlečne kisline in jo zmešamo z 20 g kristalov fenola. Mešajte, dokler se zmes ne raztopi. Dodamo 40 ml glicerola in premešamo. Nato bombažno modro raztopino precedite skozi kos filtrirnega papirja v čašo in temeljito premešajte.
Lahko pa uporabite komercialno pripravljen vir madeža. Madež shranjujte pri sobni temperaturi.
Diapozitiv mikroskopa označite z identifikacijskim imenom ali številko vzorca. Z enim sterilnim kapalnikom položite eno kapljico vzorca vode na sredino mikroskopskega stekelca. Za suh vzorec na diapozitiv položite eno kapljico 70-odstotne alkoholne raztopine in nato s sterilno zanko vmešajte suh vzorec v alkohol.
S čisto kapalko na sredino stekelca nanesite dve kapljici laktofenolnega bombažno modrega madeža. Če na diapozitivu uporabljate 70-odstotni alkohol, to storite, preden alkohol izhlapi z diapozitiva.
Dotaknite se enega roba pokrovčka mikroskopa na en rob mokrega vzorca. Drsnik naj nežno pade na pripravo vzorca, tako da pod drsnik ne zadržite zračnih mehurčkov. Obarvan vzorec je zdaj pripravljen za pregled pod mikroskopom.
